[发明专利]产透明质酸重组表达载体pQHK和pHK及其构建方法有效
| 申请号： | 201110006214.6 | 申请日： | 2011-01-13 |
| 公开（公告）号： | CN102154360A | 公开（公告）日： | 2011-08-17 |
| 发明（设计）人： | 毛自朝;杨发祥;尚海丽;程倩 | 申请（专利权）人： | 云南省微生物发酵工程研究中心有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12N15/66 |
| 代理公司： | 昆明正原专利代理有限责任公司 53100 | 代理人： | 金耀生 |
| 地址： | 650217 云南*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明是生产透明质酸的重组表达载体pQHK和pHK及其构建方法。本发明的pQHK和pHK均由载体pQE80L起始构建，含有透明质酸合成酶pmHas和尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶kfiD基因，且T5驱动了pmHas和kfiD的共表达。pHK因含有源于质粒pBBR122，能广谱的在革兰氏阴性细菌中复制的必需片段，在大部分革兰氏阴性细菌中有较好的活性，可用于革兰氏阴性细菌（其他非大肠杆菌）来生产透明质酸。用本发明的重组表达载体构建的工程大肠杆菌能产透明质酸2g～2.5g/L,比现有通过工程大肠杆菌生产的透明质酸产量提高近10倍多。 | ||
| 搜索关键词： | 透明 重组 表达 载体 pqhk phk 及其 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种产透明质酸重组表达载体pQHK，其特征在于含有透明质酸合成酶基因pmHas，T5 启动子与尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶基因kfiD的基因片段T5:kfiD和起始构建载体pQE80L，由T5启动子驱动透明质酸合成酶基因pmHas和尿苷二磷酸葡萄糖脱氢酶基因kfiD的共表达；所述的透明质酸合成酶基因pmHas的编码区核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述的基因片段T5:kfiD的核苷酸序列如SEQ ID No.9所示。
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