[发明专利]大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA双价RNAi表达载体及应用

摘要

本发明公开了一种大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA双价RNAi表达载体，它是从大豆籽粒中克隆了大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA基因，用绿色荧光蛋白GFP作为中间片段，构建了大茎环结构的KTi和SBA双价RNAi表达载体，以植物表达载体pCAMBIA3301为基础，用大豆种子特异性启动子7αP，并插入大茎环结构的KTi和SBA双干扰元件，获得了重组表达载体pCAMBIA3301-7αP-SBAF-KTiF-GFP-KTiZ-SBAZ，通过遗传转化，获得的转基因大豆品种的胰蛋白酶抑制剂活力平均降低了83％，凝集素活性也有大幅度降低，从而降低了饲料加工成本，期望为畜牧业增加更大的经济效益。

主权项

一种大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA双价RNAi表达载体，其特征在于：它是在pCAMBIA3301的EcoR I和Xba I酶切位点中，插入大豆种子特异性启动子7αP，在Xba I和Pst I酶切位点中，插入了大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA反义连接片段SBAF‑KTiF，在Pst I和Bgl II酶切位点中，插入了绿色荧光蛋白GFP基因片段，在Bgl II和BstE II中插入了大豆胰蛋白酶抑制剂KTi和凝集素SBA正义连接片段KTiZ‑SBAZ。