[发明专利]鹅源免疫球蛋白轻链Igλ全基因序列及克隆方法

摘要

本发明提供克隆一条鹅免疫球蛋白轻链Igλ全基因序列，同时还公开了克隆鹅抗体轻链Igλ全基因序列的方法。本发明通过以近源物种的保守序列设计兼并引物，从鹅脾脏淋巴细胞全RNA序列进行反转录得到cDNA，扩增出鹅抗体相关序列，并且再设计一对特异性引物验证扩增出确切的轻链可变区序列。进而通过利用RACE克隆策略扩增出整条鹅轻链Igλ基因。所述的引物适用于克隆和表达鹅轻链Igλ全基因序列。本发明公开了一种获得鹅抗体轻链Igλ基因的方法。本方法具有特异性、准确性。本发明为探讨水禽抗体基因研究，鹅基因工程抗体研究及研究新型的抗病免疫制剂提供理论和实验基础。

主权项

1.鹅抗体轻链Igλ的全基因序列、引物及克隆鹅抗体轻链Igλ的全基因序列的方法Igλ全基因序列：序列14TCGGCGTGGGGACGCGCAGCTGGTGGGATCTCGCCATGGCCTGGGCCCCTCTCCTCCTCG60CGGTGCTCGCCCACACCTCAGGTTCCCTGGTCCACGCTGCAACGACTCAGCCGGCCTCGA120AGTCGGTGAACCCGGGAGAAACCGTGCAGATCACCTGCTCCGGGGGTGGCAGCTGGTATG180GCTGGTACCAGCAGAAGACCCCTGGCACTGGCCCTGTCACCGTGATCTATGACAACAACA240AGAGACCCTCGGACATCCCTTCACGATTCTCTGGTTCCAAATCTGGGTCCACAGCCACGC300TAACCATCACTGGGGTCCAAGCCGAGGACGAGGCCGTCTATTACTGTGCGAGCTACGACA360GCAGTAGTGGTACTGATGTATTTGGGGCCGGGACCACGTTGACCGTCCTGGGCCAGCCCA420AGACGTCTCCCAGCATCTACCTCTTCCCGCCATCCTCCGACGAGATCAACTCGCAGAACA480AGGCCACCCTGGTGTGCCTGATGAGCGACTTCTACCCCAGCCCGGTGCAGGTGACCTGGA540AAGTCGACGGTTCCACCCGCACCAGTGGCGTGGAGACCTCTGCGTCCCAGAGGCAGAGCA600ACAACCAGTACATGGCCAGCAGCTACCTGACGCTGAGCGCTACAGAGTGGAAGACCGTCC660AGTCCTTCAGCTGCCAGGTCACGCACGAAGGCGCTGTCACCGAGAAGACCCTGAACAAAT720CCGAGTGCTCGTAACCCAGACGGGGCACAGCCACGAAGACAGTGGCTCCTCACCCTTCCT780GTCCCTCTTGGCCGCTGCTGGTGACAGCAGCCCCCCCTCCTCACCCGGATGTCCCCCCTC840ATGCCCCTGCCATCCCCCTGTGCCTGTCCCCTGCTCCTGTCCCCCTCCGCCGGGTGTCAC900ACAAATAAACACCAACACTTAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA引物：序列1：GGAGAMACCGTSMAGATCACCTGC序列2：GACGGTCAGSDTKGTCCCGGCYCC序列3GGCAGTGCCCCTGTCACTGTG序列4TTACGAGCACTCGGATTTGTTC序列5ATCTACCTCTTCCCGCCATCCTCC序列6GTCCCAGAGGCAGAGCAACAACCA序列7GGAACCAGAGAATCGYGAAGGG序列8GAAGTCGCTCATCAGGCACACC序列9GTGGAACCGTCGACTTT1.如权利要求1.所述的全基因序列，其特征在于，鹅抗体轻链基因包括947bp，其第104-369位核苷酸为轻链可变区(V)编码序列，为鹅免疫球蛋白轻链相关基因序列。