[发明专利]一种检测遗传性胸主动脉瘤和夹层相关基因突变的方法

摘要

本发明涉及一种检测遗传性主动脉瘤和夹层相关基因突变的方法，具体的涉及一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，该方法包括a)针对TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因13个突变位点设计并制备一组多重寡核苷酸连接检测探针，探针的核苷酸序列为SEQ ID No.1-SEQ ID No.26，b)DNA样本变性与探针杂交，进行连接反应；c)用通用引物对探针序列进行PCR扩增；d)液相芯片检测扩增产物。该技术可以实现单管反应检测多达几十个突变位点，通量高，操作简便、成本低。

主权项

一种检测TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变的多重寡核苷酸连接检测探针结合液相芯片的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：a.设计并制备用于TGFBR1、TGFBR2和ACTA2基因突变检测的多重寡核苷酸连接检测探针；b.将待测DNA样品和步骤a所得探针加入反应管中，加入连接反应与PCR扩增反应所需试剂，DNA样本变性与探针杂交，通过调节反应温度激活连接酶，对探针进行连接反应；c.调节反应温度激活DNA聚合酶，用一对通用引物对步骤b所得完成连接的探针序列进行PCR扩增反应；d.将步骤c所得PCR扩增反应产物与液相芯片中的xTAG微球进行杂交，杂交反应后加入链霉素亲和素‑藻红蛋白进行反应，然后通过路明克斯液相芯片设备检测荧光信号。