[发明专利]一种液体纤维二糖酶的发酵生产方法

摘要

本发明涉及一种液体纤维二糖酶的发酵生产方法，它是采用黑曲霉诱变株作为生产菌株，在低糖培养基上进行液体深层通风发酵生产纤维二糖酶制剂，该方法能使酶合成不受阻遏而且生长迅速，其生产的纤维二糖酶无毒、无害，可应用于、食品、能源、饲料以及环保等领域，尤其可用于植物纤维乙醇的大规模生产，开辟了利用农业废弃物生产能源的有效途径。而且该方法具有酶活与成本比值高，技术易掌握、发酵周期短、产品质量稳定，无毒无污染等优点。同时发酵得到酶制剂后分离出的固体残渣含有一定量的纤维二糖酶和菌体蛋白等营养物质，用作饲料添加剂效益明显。

主权项

一种液体纤维二糖酶的发酵生产方法，其特征在于：它包括以下步骤：（1）菌种：使用纤维二糖酶生产菌株中的黑曲霉菌株作为生产菌株，于PDA斜面保藏备用；（2）菌种培养：挑取菌苔旺盛的步骤1斜面保藏备用的菌种放入培养瓶中，在28～32℃的温度条件下培养1～3天，移入装有培养基的种子罐中，移入的菌种量为培养基的1% ～6%，在28～32℃温度、通风比0.1～0.7v/v条件下培养12～36小时，制得生产发酵菌种；（3）发酵处理：按以下重量百分比的比例制备成混合发酵浆料，2～10%的发酵菌种，2～8%粉碎粒度0.8mm 以下的玉米芯，0.5～1.5%的玉米浆，0.3～1%的营养盐，其余为水； 将发酵浆料放入发酵罐中，通风量0.1～0.7v/v、搅拌转速100～350rpm进行通风搅拌发酵，并在发酵20～30h后每隔2～6小时按初始发酵浆料重量流加重量百分比为0.1～3%的玉米浆和重量百分比为0.1～1.0%的粉碎粒度0.8mm 以下的玉米芯，温度控制在26～34℃，发酵5～7天，经板框过滤滤去发酵浆液中的残渣即可制成液体纤维二糖酶。