[发明专利]一种人凝血酶原复合物的生产方法

摘要

本发明涉及到一种人凝血酶原复合物的生产方法。其特点是：采用从血浆中直接分离提取，病毒灭活，精制，二次病毒灭活，即得人凝血酶原复合物成品。本发明采用从血浆中直接分离提取，分离条件温和，产品的批间差异小，凝血因子活性稳定，收获率高，且基本没有激活现象发生。病毒灭活工艺采用S/D法和干热灭活法相结合的方法，充分保证了产品的病毒安全性。

主权项

一种人凝血酶原复合物的生产方法，包括：A.分离提取将原料血浆融化，保持血浆温度在0～4℃，在此温度下离心去除冷沉淀，把上清升温至12～14℃，加入溶胀的凝胶搅拌，吸附45分钟，收集凝胶，用洗涤液快速冲洗凝胶3次或以上，再用洗脱液浸泡10分钟/次，共3次，将制品洗脱下来，收集洗脱蛋白液进行超滤，预浓缩，再用透析液超滤，使残余氯化钠浓度小于0.85％(g/ml)，将制品浓缩至IX因子效价在10IU/ml左右，计量浓缩液的重量；B.S/D病毒灭活C.精制将S/D病毒灭活结束的蛋白液加入平衡处理好的凝胶，吸附45～60分钟。用洗涤液快速洗涤凝胶3次或以上，以去除残余的S/D。再用洗脱液浸泡10分钟/次，共洗3次，将制品洗脱下来，收集洗脱蛋白液进行超滤，预浓缩，再用3～5倍体积透析液超滤，使残余氯化钠浓度小于0.85％(g/ml)，将制品浓缩至IX因子效价在30IU/ml左右将超滤浓缩后蛋白液，调整PH值6.8～7.0，补加透析液，使制品的IX因子最终效价为25IU/ml左右，加入保护剂后除菌、分装、冻干；D.二次病毒灭活冻干后的制品经80℃，72小时干热处理，进行第二次病毒灭活。