[发明专利]一种获得转基因海岛棉的方法无效
| 申请号： | 201110037241.X | 申请日： | 2011-02-14 |
| 公开（公告）号： | CN102174564A | 公开（公告）日： | 2011-09-07 |
| 发明（设计）人： | 陈勋基;郝晓燕;李建平;危晓薇;邵琳;足木热木;黄全生 | 申请（专利权）人： | 新疆农业科学院核技术生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12Q1/68;A01H5/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 830091 新疆维*** | 国省代码： | 新疆;65 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种获得转基因海岛棉的方法。只需要制备相应的农杆菌菌液，离心回收，加入1/2MS培养基、20％蔗糖、0.1‰(v/v)Selwet和0.1‰(v/v)DMSO，使之OD值达到0.6左右，装小喷壶，选取早晨刚展开的海岛棉花朵，对准柱头进行喷施，喷完后套纸管，做标记，待种子成熟后，种植转化T0代进行标记基因检测及PCR检测。该方法操作简单，不受基因型限制，转化效率较高，减轻了工作量，将会促进海岛棉基因转化研究，加快分子育种进程。目前，还未见有关海岛棉农杆菌侵染法转化的报道。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 获得 转基因 海岛棉 方法 | ||
【主权项】：
一种获得转基因海岛棉的方法，其特征在于，包括以下步骤：构建植物表达载体，将构建好的表达载体转化农杆菌，挑取阳性克隆，在YEB培养基上摇菌，待菌液浓度达到1.2‑1.6时，收集菌体，在收集的菌体中加入渗透培养基，混匀得到农杆菌悬浮液；将所述农杆菌悬浮液对刚展开的海岛棉花朵进行喷雾，喷雾后用套管套住该花朵，并做好标记，生育期结束收获转化种子，进入下一代种植，种植的F1代幼苗在3叶期时进行卡那霉素或除草剂检测；筛选不变色的植株进行PCR检测，获得转化阳性的F1代植株，进行Southern检测，所有阳性苗留种，种植并获得纯化转基因株系。
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