[发明专利]一种诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒及制备与使用方法

摘要

本发明公开一种检测马属动物是否感染驽巴贝斯虫病的检测试剂盒，以及这种试剂盒的制备方法和使用方法。本发明的诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒中至少有四条驽巴贝斯虫特异性引物组成。本发明的检测试剂盒使用方法是以待测马属动物血液提取血液基因组DNA为模板，将其与DNA聚合酶、缓冲液、灭菌超纯水以及试剂盒中的驽巴贝斯虫特异性引物混合物按比例混合均匀后，进行环介导的恒温扩增，扩增产物置于含溴化乙锭的琼脂糖凝胶中，进行电泳，在紫外灯下观察，根据特定泳道是否出现特异性电泳带型确定被检动物是否患有驽巴贝斯虫病。

主权项

一种诊断驽巴贝斯虫的检测试剂盒，其特征是检测试剂盒中至少有四条驽巴贝斯虫特异性引物组成，这四条引物是：上游外侧引物为序列表中SEQ IDNO：1的核苷酸序列Bc F3；下游外侧引物为序列表中SEQ ID NO：2的核苷酸序列Bc B3；上游内引物Bc FIP是由序列表中SEQ ID NO：3的核苷酸序列Bc F1c与序列表中SEQ ID NO：4的核苷酸序列的上游中间引物Bc F2经连接子L1连接而成的；下游内引物Bc BIP是由序列表中SEQ ID NO：5的核苷酸序列Bc B1c与序列表中SEQ ID NO：6的核苷酸序列的下游中间引物Bc B2经连接子L2连接而成的，连接子L1和L2是由4～6个核酸碱基组成。