[发明专利]用基因工程技术制备唾液酸

摘要

本发明公开了一种基因工程制备唾液酸的方法。采用重组酶法生产唾液酸的生产工艺，即通过亚克隆的方法将催化唾液酸合成的两个关键酶一异构化酶和唾液酸醛缩酶构建在同一表达质粒中，转化入同一大肠杆菌宿主菌内，通过发酵表达两个重组酶，离心收集菌体，将菌体固定化，用固定化菌体中的多重组酶来催化葡萄糖胺和丙酮酸完成合成反应，得到唾液酸。检测方法是用酸水解方法将结合状态的唾液酸变成游离状态，游离状态的唾液酸与间苯二酚反应生成有色化合物，再用有机酸萃取后，测定唾液酸含量。采用本发明作为唾液酸的生产和检测方法，大大简化了流程和降低了成本，能使生产效率显著提高。

主权项

一种用基因工程技术制备唾液酸的方法，其关键技术在于构建筛选唾液酸基因工程菌株，具体为通过亚克隆的方法将催化唾液酸合成的两个关键酶一异构化酶和唾液酸醛缩酶构建在同一表达质粒中，转化入同一大肠杆菌宿主菌内，再进行菌种筛选得到基因工程菌，用于唾液酸制备。