[发明专利]副猪嗜血杆菌实时荧光定量PCR检测方法无效
| 申请号： | 201110048711.2 | 申请日： | 2011-03-01 |
| 公开（公告）号： | CN102174653A | 公开（公告）日： | 2011-09-07 |
| 发明（设计）人： | 李军;陈泽祥;杨威;谢宇舟;彭昊;禤雄标;谢永平;许力干;胡帅;马春霞;潘艳 | 申请（专利权）人： | 广西壮族自治区兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12R1/21 |
| 代理公司： | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人： | 翁建华 |
| 地址： | 530001 广西*** | 国省代码： | 广西;45 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种副猪嗜血杆菌实时荧光定量PCR检测方法，选取具有高度保守性和特异性且是细菌分类鉴定主要靶基因的16S rRNA基因(AB004028)作为扩增靶基因，以该基因属内高度保守区域作为扩增区域设计特异性引物，建立了荧光染料SYBR GreenI与DNA嵌合的副猪嗜血杆菌实时荧光定量PCR检测方法，通过已知标准品的标准曲线可对猪嗜血杆菌16S rRNA基因初始模板的DNA进行准确定量，并等同于细菌的数量。本发明的方法通用性强、特异性高，能够检测多种HPS血清型，而又不受相关菌的影响，可用于快速准确地对严重危害养猪业发展的副猪嗜血杆菌进行定量检测。 | ||
| 搜索关键词： | 嗜血 杆菌 实时 荧光 定量 pcr 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种副猪嗜血杆菌实时荧光定量PCR检测方法，通过荧光染料嵌合PCR反应中所发出的荧光信号进行检测，其特征在于以登录号AB004028的副猪嗜血杆菌的16S rRNA基因序列为参考，其引物序列和扩增序列分别为：引物序列1 5’‑GAC GGG AAA CTG TCG CTA‑3’引物序列2 5’‑CTA GAG ATC GTC GGC TTG‑3’扩增序列为序列表SEQ.ID.No.3的碱基序列。
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