[发明专利]一种对转入玉米的Bar基因进行筛选的方法无效
申请号: | 201110051769.2 | 申请日: | 2011-03-04 |
公开(公告)号: | CN102181475A | 公开(公告)日: | 2011-09-14 |
发明(设计)人: | 季静;王罡;汪婷婷;关春峰 | 申请(专利权)人: | 天津大学 |
主分类号: | C12N15/82 | 分类号: | C12N15/82;C12Q1/68;A01H4/00;A01H5/00 |
代理公司: | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人: | 王小静 |
地址: | 300072*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种对转入玉米的Bar基因进行筛选的方法。包括以下步骤:经过预培养的外植体接种于携带双元质粒p3300的农杆菌菌株EHA105的菌液中浸染,侵染后的外植体经共培养、含有草甘膦的筛选培养基I与筛选培养基II中筛选,再依次经过再生培养基I与再生培养基II中再生培养诱导形成胚状体和苗体,选择苗体盆栽得到的抗性植株,再用PCR检测和经凝胶电泳法证实筛选获得阳性植株为转基因植株。本发明采用草甘膦作为筛选剂来进行Bar基因的抗性筛选,极大的提高了筛选效率。 | ||
搜索关键词: | 一种 转入 玉米 bar 基因 进行 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种对转入玉米的Bar基因进行筛选的方法,其特征在于:包括以下步骤:经过预培养的外植体接种于携带双元质粒p3300的农杆菌菌株EHA105的菌液中侵染,浸染后的外植体经共培养、含有草甘膦的筛选培养基I与筛选培养基II中筛选,再依次经过再生培养基I与再生培养基II中再生培养诱导形成胚状体和苗体,选择苗体盆栽得到的抗性植株,再用PCR检测和经凝胶电泳法证实筛选获得阳性植株为转基因植株;所述的双元质粒p3300是在其上的T‑DNA区含有八氢番茄红素合成酶基因(PSY)和PPT乙酰转移酶基因(Bar)。
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