[发明专利]一种能提高机体免疫力的南极适冷微生物胞外多糖

摘要

本发明涉及一种能提高机体免疫力的南极适冷微生物胞外多糖，属于医药及保健食品技术领域。本发明通过对菌种保藏号为CGMCC NO.3433的南极适冷细菌(Pseudoaltermonas sp.)S-5培养、发酵、分离、纯化后，制得适冷微生物胞外多糖。其分子量为39,7046Da，由甘露糖、葡萄糖和半乳糖按照摩尔比4.8∶50.9∶44.3构成。本发明制得的能提高机体免疫力的南极适冷微生物胞外多糖，能促进体外脾淋巴细胞的增殖，增强巨噬细胞的活性，提高机体免疫力。

主权项

一种能提高机体免疫力的南极适冷微生物胞外多糖的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将菌种保藏号为CGMCC NO.3433的南极适冷细菌(Pseudoaltermonas sp.)S‑5活化后，接种于Zobell 2216E液体培养基中，9℃培养24小时，按1wt％量接种于Zobell 2216E液体培养基扩大培养，得扩繁菌种；(2)将步骤(1)制得的扩繁菌种按10wt％的接种量，接种于液体发酵罐中的发酵培养基，向发酵培养基中加入发酵培养基重量0.3％的灭菌豆油后，7‑9℃有氧搅拌培养50‑60h，搅拌速度160‑170r/min，得液体发酵液；(3)将步骤(2)制得的液体发酵液在12000r/min下离心15min，收集上清液；(4)将步骤(3)制得的上清液在60℃条件下，旋转蒸发浓缩至原体积的1/4，得浓缩液，然后向浓缩液中加入三倍体积的95％乙醇，过夜沉淀，离心，收集沉淀；(5)将步骤(4)收集的沉淀用水溶解，加入1/3体积的seveage试剂脱去蛋白质，制得粗糖溶液；(6)将步骤(5)制得的粗糖溶液通过大孔树脂D‑301R脱色后，再经过DEAE‑Fast Flow阴离子交换柱和Sephadex G‑75层析柱分离，制得纯化的胞外多糖溶液；(7)将步骤(6)制得的胞外多糖溶液经真空冷冻干燥后，制得适冷微生物胞外多糖纯品。