[发明专利]根癌农杆菌介导的花生高效转基因方法有效
申请号: | 201110058531.2 | 申请日: | 2011-03-11 |
公开(公告)号: | CN102199621A | 公开(公告)日: | 2011-09-28 |
发明(设计)人: | 王传堂;王秀贞;李贵杰;于洪涛;唐月异;杨伟强;张建成;崔凤高;禹山林 | 申请(专利权)人: | 山东省花生研究所 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 青岛发思特专利商标代理有限公司 37212 | 代理人: | 巩同海 |
地址: | 266100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及植物转基因技术,尤其涉及一种基于根癌农杆菌介导的花生转基因方法。本发明的根癌农杆菌介导的花生高效转基因方法,包括如下步骤:(1)使用常规方法将已构建好的携带目的基因的Ti质粒载体转入根癌农杆菌;(2)转化菌体在YEP培养基中振荡培养;(3)取取2-6μl重悬的菌液,在花生生长的适宜期注入花生植株,使农杆菌在花生植株内侵染、转化;(4)收获种子后,取花生子叶组织薄片,快速提取待测样品DNA作为PCR模板;(5)使用依据目的基因序列设计的特异性引物进行PCR鉴定,电泳检测结果。本发明通过根癌农杆菌介导的转基因技术,可方便快速获得可育后代,无需单独的组培再生阶段。 | ||
搜索关键词: | 根癌农 杆菌 花生 高效 转基因 方法 | ||
【主权项】:
一种根癌农杆菌介导的花生高效转基因方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)使用常规方法将已构建好的携带目的基因的Ti质粒载体转入根癌农杆菌;(2)转化菌体在YEP培养基中振荡培养;(3)取取2‑6μl重悬的菌液,在花生生长的适宜期注入花生植株,使农杆菌在花生植株内侵染、转化;(4)收获种子后,取花生子叶组织薄片,快速提取待测样品DNA作为PCR模板;(5)使用依据目的基因序列设计的特异性引物进行PCR鉴定,电泳检测结果。
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