[发明专利]一种萝卜与芜菁属间远缘杂交获得离体胚的方法

摘要

一种萝卜与芜菁间远缘杂交获得离体胚的方法，其特征在于按以下步骤依次组成：(1)材料准备、(2)播种、(3)套袋、挂牌、(4)授粉、(5)胚胎抢救，采用本发明的方法成功获得萝卜与芜菁间远缘杂交离体胚，并培养出杂种胚幼苗，以利于得到育种新资源。

主权项

一种萝卜与芜菁属间远缘杂交获得离体胚的方法，其特征在于按以下步骤依次组成：(1)材料准备：以萝卜雄性不育为母本，以芜菁作为父本；(2)播种：芜菁和萝卜种子播种在试验大棚里，对其进行常规田间管理；(3)套袋、挂牌：萝卜和芜菁抽薹后套袋，萝卜雄性不育系每个单株单独套袋，挂牌编号标记，共10个单株，所有的数据取10个单株的平均值，大头菜不分单株，混合给萝卜授粉；(4)授粉：套袋以后，萝卜与芜菁开花时，进行人工授粉；授粉一般在早上9点和下午3点进行，效果最佳；授粉的方法：1)在授粉之前首先用水将手洗干净，然后再用酒精消毒；2)打开纱网袋，摘下已经盛开的芜菁的花朵，摘完以后立即将纱袋封好；3)再打开萝卜植株的纱网袋，将芜菁的花粉授到萝卜的柱头上；(5)胚胎抢救：1)在试验田取授粉以后的荚果，取授粉后第4‑10天的荚果，用小刀把果柄去掉；2)用70％的乙醇消毒0.5min，然后用0.1％HgCl浸泡8～10min，无菌水冲洗3次，每次用无菌水浸泡3min；接种前，用无菌滤纸吸干荚表面无菌水，将其小心剥开获得杂种胚，在超净工作台上将杂种胚珠置入分化培养基；3)当培养到长出真叶后将幼苗移至生根培养基上进行生根培养，培养室温度控制在25℃，光照16h.d‑1，光照强度2000lx，待季节恰当时将生根的幼苗移栽至营养钵中；4)胚胎抢救期间，观察统计如下数据：测量荚长、荚的横径、统计结荚率和观察并统计杂种胚珠培养的出苗率，通过胚珠培养的结果确定萝卜与大头菜远缘杂交胚抢救的最佳时期。