[发明专利]甲型H1N1流感病毒一步实时荧光定量RT-PCR试剂盒

摘要

本发明公开了一种甲型H1N1流感病毒一步实时荧光定量RT-PCR试剂盒，涉及生物技术领域中的PCR试剂盒。本试剂盒包括甲型H1N1流感病毒的一对特异性引物、一条特异性荧光探针（FP）、阳性对照、阴性对照、一步5×RT-PCR Buffer和Enzyme Mix；依据甲型H1N1流感病毒HA基因保守序列设计引物：F：5'-ATTTGAAAGGTTTGAGATATTCCC-3'；R：5'-GATGCTGCCGTTACACCTTTGTC-3'；设计探针：FAM-AACAAGTTCATGGCCCAATCATGACTCGT-BBQ。本发明检测时间周期短、检测效率高；检测病毒特异性高，准确率高；在进行病毒定量分析的同时还能进行病毒定量分析；检测灵敏度比普通PCR和免疫学检测方法灵敏度高；操作简单、易于推广；实验结果重复性好。

主权项

1.一种甲型H1N1流感病毒一步实时荧光定量RT-PCR试剂盒，其特征在于：本试剂盒包括甲型H1N1流感病毒的一对特异性引物(F和R)、一条特异性荧光探针(FP)、阳性对照、阴性对照、一步5×RT-PCR Buffer和Enzyme Mix；①甲型H1N1流感病毒的一对特异性引物(F和R)依据甲型H1N1流感病毒HA基因保守序列设计：F：5’-ATTTGAAAGGTTTGAGATATTCCC-3’  24bpR：5’-GATGCTGCCGTTACACCTTTGTC-3’   23bp；②甲型H1N1流感病毒的一条特异性荧光探针(FP)依据甲型H1N1流感病毒HA基因保守序列设计：FP：FAM-AACAAGTTCATGGCCCAATCATGACTCGT-BBQ  29bp荧光探针5’端标记荧光报告基团FAM，3’端标记荧光淬灭基团BBQ；③阳性对照甲型H1N1流感病毒标准品；④阴性对照RNase Free H₂O；⑤一步5×RT-PCR Buffer配制：配置混合后于冰箱-20℃保存；⑥Enzyme Mix配制：配置混合后于冰箱-20℃保存。