[发明专利]一种在昆虫细胞sf9中表达抗菌肽的方法无效
| 申请号： | 201110073088.6 | 申请日： | 2011-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN102191251A | 公开（公告）日： | 2011-09-21 |
| 发明（设计）人： | 康春涛;张双全 | 申请（专利权）人： | 盐城星海饲料有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/12 | 分类号： | C12N15/12;C12N15/866;C12N7/01;C07K14/435;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛 |
| 地址： | 224233 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及生物基因工程领域，公开了一种在昆虫细胞sf9中表达抗菌肽的方法。本发明方法包括如下步骤：(1)将抗菌肽CM4基因克隆入pFastBacHT B载体得到重组质粒pFastBacHTB-ABP；(2)将重组质粒pFastBac HTB-ABP转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，获得重组杆状病毒穿梭载体Bacmid-ABP；(3)Bacmid-ABP转染Sf9昆虫细胞，获表达抗菌肽的重组病毒。经Western blotting检测，结果表明目的基因在昆虫细胞中获得融合表达。本实验建立的昆虫/杆状病毒表达系统为抗菌肽的大量获得提供一条新途径，为进一步的抗菌机理的研究及新药的开发打下工作基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 昆虫 细胞 sf9 表达 抗菌 方法 | ||
【主权项】：
在昆虫细胞sf9中表达抗菌肽的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将两端分别包含BamHI和HindIII酶切位点的抗菌肽CM4基因克隆入pFastBacHTB载体的BamHI/HindIII位点间得到重组质粒pFastBac HTB‑ABP；(2)将重组质粒pFastBac HTB‑ABP转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，与其中的杆状病毒穿梭载体Bacmid重组，获得插入ABP基因的重组杆状病毒穿梭载体Bacmid‑ABP；(3)脂质体介导重组杆状病毒穿梭载体Bacmid‑ABP转染Sf9昆虫细胞，获表达抗菌肽的重组病毒；(4)培养所述的重组病毒，表达抗菌肽CM4。
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