[发明专利]肿瘤坏死因子受体Ⅱ-脂联素球部融合蛋白改构体快速筛选方法及其应用有效
| 申请号： | 201110073658.1 | 申请日： | 2011-03-25 |
| 公开（公告）号： | CN102690353A | 公开（公告）日： | 2012-09-26 |
| 发明（设计）人： | 高基民;董小岩;刘丹;陆月;吴小兵 | 申请（专利权）人： | 温州医学院;北京五加和分子医学研究所有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/62;C12N15/861;A61K38/19;A61K48/00;A61P19/02;A61P29/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 325035 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | 本发明改构了可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ-“脂联素”球部重组融合蛋白的基因序列，去除了肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部基因间的冗余序列，共去除18个氨基酸，形成了只含有可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ和“脂联素”球部的新的基因；并合成了改造后的基因在哺乳动物细胞中表达的偏爱密码子。经过比较，改构后的基因表达的蛋白更加稳定，优化的密码子在哺乳动物细胞中表达效率提高约4-6倍。本发明还建立了一种快速大量获得蛋白的腺病毒/BHK21表达系统，该表达系统的生产规模易于放大，适应无血清培养，可以反复多次收获目标蛋白，成功制备了有生物学活性的改造后的融合蛋白。 | ||
| 搜索关键词： | 肿瘤 坏死 因子 受体 脂联素球部 融合 蛋白 改构体 快速 筛选 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
本发明描述了一种经改构了的肿瘤坏死因子受体Ⅱ‑脂联素球部的融合蛋白，其技术特征是去掉了原肿瘤坏死因子受体Ⅱ‑脂联素球部之间的酶切位点和胶原序列，其三聚体化的基因表达重组蛋白的结构更加稳定。
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