[发明专利]土茯苓组培苗的培养方法

摘要

本发明公开了一种土茯苓组培苗的培养方法，包括植物外植体的选择及无菌处理，丛生芽的诱导培养、增殖培养、壮苗培养和生根培养。本发明的优点在于：选用配方合理的培养基，培养出的组培苗生根率高，稳定性好。该方法易操作，而且不受外界条件的限制，四季皆可进行，节约育苗占地面积，降低生产成本，不污染环境，可以实现批量生产。通过本发明方法生产土茯苓，产量大，成本低，周期短，极具市场竞争力。

主权项

一种土茯苓组培苗的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)植物外植体的选择及无菌处理：选择土茯苓野生植物根状茎为外植体，用自来水冲洗干净，再用蒸馏水冲洗，切取侧芽，将侧芽组织置于超净工作台中，用75％酒精消毒30～60秒，再用浓度为0.1％～0.2％升汞溶液消毒6～10分钟，无菌水冲洗3～5次，最后用滤纸吸干无菌水，无菌条件下剥取侧芽生长锥；(2)丛生芽诱导培养：将剥取的侧芽生长锥接种到丛生芽诱导培养基MS+BA 1.0～2.0mg/L+IBA 0.1～0.5mg/L+NAA 0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30mg/L+琼脂6～7mg/L中诱导侧芽，培养期为30天；(3)增殖培养：将诱导出的丛生芽接种到增殖培养基MS+BA 2.0～4.0mg/L+NAA 0.2～0.4mg/L+蔗糖20～30mg/L+琼脂6～7mg/L中进行继代培养，30天继代一次，连续转接3次，培养期为90天；(4)壮苗培养：将增殖培养出的丛生芽切成单芽或者小丛芽，接种到壮苗培养基MS+BA0.8～1.0mg/L+KT 0.5～0.7mg/L+IBA 0.1～0.3mg/L+蔗糖20～30mg/L+琼脂6～7mg/L中，培养期为30天；(5)生根培养：将壮苗培养后的开叶的小苗接种到生根培养基1/2MS+NAA 0.5～0.9mg/L+IBA 0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30mg/L+琼脂6～7mg/L中，培养期为40天；步骤(2)～(5)中所述培养基pH值为5.5～5.8，培养温度为23℃～27℃，光照时间为10～14小时/天，光照强度为100μmol/m2·S。