[发明专利]一种荧光检测植物木聚糖分布的方法

摘要

本发明提供一种荧光检测植物木聚糖分布的方法，它包括制备重组蛋白，制备植物切片，荧光检测木聚糖分布等步骤。本发明还公开了基于该办法制备木聚糖检测试剂盒的应用。本发明的方法使用有荧光蛋白标记的木聚糖结合蛋白与木聚糖结合发出荧光来检测木聚糖分布的原理代替以往的免疫荧光法，即降低了检测时间，又降低了耗材的费用，提高了检测的灵敏度和稳定性，提高了检测效率，容易放大操作。

主权项

一种荧光检测植物木聚糖分布的方法，其特征在于：该方法包括以下步骤：1)制备重组蛋白将目的蛋白的质粒转入大肠杆菌中，加入IPTG诱导蛋白表达。离心收获细胞，超声波破碎细胞。之后过镍柱洗脱该重组蛋白。透析后，蛋白溶液制备完成。2)制备植物切片将植物材料用石蜡包埋成方块。用旋转切片机切成薄片，粘在载玻片上。用二甲苯脱蜡，经酒精溶液置换入水中。用盖玻片封好备用。3)检测植物切片木聚糖的分布用制备的重组蛋白溶液浸泡有植物切片的载玻片30min，冲洗3～4次，滤纸吸干后放置在倒置荧光显微镜下检测绿色荧光的分布，即为植物切片中的木聚糖分布。