[发明专利]一种齿肋赤藓原丝体的培养与保存方法

摘要

本发明公开了一种齿肋赤藓原丝体培养和保存的方法。通过首先选择合适的材料，经冲洗、消毒、冲洗、风干、研磨等处理，然后将苔藓碎片接种于BG11固体培养基，在光照培养箱中22℃光照强度27μmol·m-2·s-1，光照/黑暗时间为14h/10h条件下培养诱导原丝体的出现，然后转入液体培养逐级扩繁。原丝体经收集后，经自然风干装于封口塑料袋，然后置于-80℃下保存。本发明有利于齿肋赤藓进行大量人工扩繁，而原丝体可以发育成新的植株，这将为齿肋赤藓的人工繁殖提供了新的途径，具有广阔的应用领域。

主权项

一种齿肋赤藓原丝体的培养方法，其特征在于，所述的具体培养步骤包括：(1)材料选择与处理：在古尔班通古特沙漠选择以齿肋赤藓为建群种发育良好的藓类结皮斑块，挑选一些生长健壮的齿肋赤藓植株；先用自来水冲洗干净，再用无菌蒸馏水反复冲洗；在无菌操作台将清洗干净的苔藓植株在70％的酒精浸泡消毒20s，取出后再用无菌蒸馏水冲洗3‑4次；将清洗干净的苔藓植株置于无菌操作台上用无菌风自然风干；在已灭菌的研钵内，将风干的苔藓植株轻微研磨成碎片待用；(2)接种与培养：将上述步骤获得的苔藓碎片用无菌蒸馏水稀释，然后接种在盛有BG11固体培养基的培养皿中，用parafilm封口膜封口；将培养皿置于光照培养箱中，温度22℃，采用光照强度27μmol·m‑2·s‑1，光照条件和黑暗条件分别为14h、10h，而且为两者交替进行；培养3周后，苔藓碎片上开始长出原丝体，再过10d后在无菌操作台上收集苔藓原丝体；(3)扩大培养：将上述制备获得的苔藓原丝体转入装有BG11液体培养基的200ml培养瓶中，BG11培养基中添加2％W/W的蔗糖，温度22℃，光照强度27μmol·m‑2·s‑1；培养3‑4周后，再次将原丝体转入10L大培养瓶中，液体培养基5‑6L，通气培养，通气量为5L·h‑1，其它培养条件不变，培养一个月可采收。