[发明专利]一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用有效
| 申请号： | 201110093484.5 | 申请日： | 2011-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN102191213A | 公开（公告）日： | 2011-09-21 |
| 发明（设计）人： | 危宏平;赵金凤;王殿冰;张治平;张先恩 | 申请（专利权）人： | 中国科学院武汉病毒研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/53;C12N9/02;C12Q1/66;C12Q1/06;C12R1/19 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430071*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明一种萤火虫荧光素酶的编码基因及制备方法和应用，包括步骤：1.突变酶突变位点的引入：2．鉴定重组质粒；3．测序，获得带有1060位突变位点的PCR片段；4．经胶回收纯化后，用限制性内切酶，获得大肠杆菌；5．鉴定重组质粒，得到一种分离的蛋白基因；6．培养大肠杆菌；7．将重组质粒转化BL21感受态细胞，得到表达突变酶的菌株；8．将上述获得的BL21表达菌株培养；9．将5蛋白的菌液离心，再通过超声破碎，离心获取上清；10．测定，获得有高热稳定性又有高酶活的萤火虫荧光素酶。一种萤火虫荧光素酶的基因在食品、医药、菌体检测上的应用。该突变酶的发光强度是野生型的15-20倍左右，并且较野生型具有良好的热稳定性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 萤火虫 荧光 编码 基因 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种大肠杆菌，其特征在于：大肠杆菌DH5α‑firefly luciferase‑E354K,I423L,D436G,L530R，CCTCC NO.M2011062。
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