[发明专利]检测外源基因的核酸杂交膜条及其应用

摘要

本发明涉及一种检测外源基因的核酸杂交膜条及其应用，属于生物工程领域。本发明所述的膜条上的每一条特异性捕获探针有30-37个碱基，分别针对一种转入到植物中的外源基因，在探针的5′端加oligo(dt)n并用氨基标记。本发明系统检测植物外源基因包括以下步骤：探针设计、探针合成、核酸杂交膜条制备、探针固定、样品NDA提取、样品NDA标记、杂交和显色。植物外源基因检测过程无放射性同位素，且杂交、显色和相应的洗涤步骤是在封闭的一次性微管中进行，检测结果可肉眼观察，检测过程方便、安全。本发明可用于植物种子、食品及其加工过程、观赏型植物繁殖体等植物种质资源和产品的外源基因检测。

主权项

一种检测外源基因的核酸杂交膜条，其特征在于通过以下方法制得：首先根据转基因植物中的外源基因对应设计出匹配探针：从来自转基因植物中的外源基因的保守区域特异捕获探针，并在探针的5′加oligo(dt)n；其中，oligo(dt)n为5‑15个寡核苷酸；对探针的5′端进行氨基修饰；其次，将得到的探针固定于核酸杂交膜条基底膜片上：在核酸杂交膜条基底膜片上划格，方格大小为0.1‑1.0 cm，格间呈矩阵排列；基底膜片经EDC活化处理20‑40 min；通过点样装置，将加oligo(dt)n和氨基修饰过的探针按照矩阵规律点样于基底膜片上，经过水合固定和干燥处理后制成核酸杂交膜条，然后干燥，得到核酸杂交膜条。