[发明专利]基于磁分离与高保真聚合酶校正功能的核酸序列分析方法有效
| 申请号： | 201110097983.1 | 申请日： | 2011-04-19 |
| 公开（公告）号： | CN102191328A | 公开（公告）日： | 2011-09-21 |
| 发明（设计）人： | 何农跃;曾新 | 申请（专利权）人： | 东南大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 李纪昌 |
| 地址： | 210096 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 一种基于磁分离与高保真聚合酶校正功能的核酸序列分析方法，1)将耐核酸外切酶消化的测序引物固定于磁性介质上，与待测DNA序列进行杂交；2)加入成分包括不具有核酸外切酶活性之DNA聚合酶的延伸反应溶液，延伸经过标记的脱氧核糖核苷酸单体与双脱氧核糖核苷酸单体，通过检测标记物信号得到核苷酸种类与个数信息；3)加入成分包括具有核酸外切酶活性之高保真DNA聚合酶的延伸反应溶液，利用高保真聚合酶的校正功能移除2)中已延伸的ddNTP并替换延伸上耐核酸外切酶消化的核苷酸单体；4)对磁性介质进行磁分离并清洗；循环上述步骤2)、3)和4)所进行的过程，直到确定待测DNA中的核苷酸序列信息。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 分离 高保真 聚合 校正 功能 核酸 序列 分析 方法 | ||
【主权项】：
一种基于磁分离与高保真聚合酶校正功能的核酸序列分析方法，其特征在于：1) 将耐3’‑5’核酸外切酶消化的测序引物固定于磁性介质上，与待测DNA序列进行杂交；2) 加入成分包括不具有3’‑5’核酸外切酶活性之DNA聚合酶的第一步延伸反应溶液，延伸经过标记的脱氧核糖核苷酸单体与双脱氧核糖核苷酸单体，通过检测标记物信号得到核苷酸种类与个数信息；3) 加入成分包括具有3’‑5’核酸外切酶活性之高保真DNA聚合酶的第二步延伸反应溶液，利用高保真聚合酶的校正功能移除2)中已延伸的ddNTP并替换延伸上耐3’‑5’核酸外切酶消化的核苷酸单体；4) 对磁性介质进行磁分离并清洗；循环上述步骤2)、3)和4)所进行的过程，直到确定待测DNA中的核苷酸序列信息。
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