[发明专利]绵羊肺炎支原体Hsp70(DnaK)C末端基因重组质粒有效
申请号: | 201110098141.8 | 申请日: | 2011-04-19 |
公开(公告)号: | CN102242140A | 公开(公告)日: | 2011-11-16 |
发明(设计)人: | 王玉炯;李敏;谢琴;刘晓明;马春骥;徐庆春 | 申请(专利权)人: | 宁夏大学 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12R1/35;C12R1/19 |
代理公司: | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人: | 叶学军 |
地址: | 750021 宁夏回族自治区银川*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | 一种绵羊肺炎支原体Hsp70(DnaK)C末端基因重组质粒,其构成方法为:首先设计并合成如下引物:P2:GGGGTCGACTTAATTTTGTTTGATTTC;P3:CAGGGATCCACTCCTTTAACTTTAGG,再以质粒T-Hsp70为模板,利用上述引物P2、P3进行PCR扩增,得到Hsp70C末端基因cDNA片段,片段大小约为700bp,将该片段与pET28a(+)相连接,获得重组质粒pET28a(+)-Hsp70C,进一步将重组质粒转化至BL21(DE3)中,并对表达产物进行SDS-PAGE,得到大小约为29kDa的目的蛋白。 | ||
搜索关键词: | 绵羊 肺炎 支原体 hsp70 dnak 末端 基因 重组 质粒 | ||
【主权项】:
一种绵羊肺炎支原体Hsp70(DnaK)C末端基因重组质粒,其构成方法为:首先设计并合成如下引物:P2: GGGGTCGACTTAATTTTGTTTGATTTC;P3: CAGGGATCCACTCCTTTAACTTTAGG,再以质粒T Hsp70为模板,利用上述引物P2、P3进行PCR扩增,得到Hsp70 C末端基因cDNA片段,片段大小约为700 bp,将该片段与pET28a(+)相连接,获得重组质粒pET28a(+) Hsp70C,进一步将重组质粒转化至 BL21(DE3)中,并对表达产物进行SDS PAGE,得到大小约为29 kDa的目的蛋白。
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