[发明专利]一种发酵法生产天然β-胡萝卜素的方法和应用

摘要

本发明提供了一种通过三孢布拉霉发酵生产并提纯β-胡萝卜素的方法和应用，所述方体包括以下步骤：a)将三孢布拉霉菌株分别接种到PDA培养基上，得到孢子悬浮液；b)上述新鲜孢子悬浮液中的孢子在种子罐中培养繁殖成发酵用种子；c)将上述种子罐中所述发酵用种子接种到发酵罐中发酵成发酵液；d)向发酵液中用有机碱或无机碱调节发酵液为碱性，过滤得湿菌丝体；e)疏水性非极性有机溶剂处理湿菌丝体，浸提、连续压滤后得到湿菌丝体；f)用酯类有机溶剂与湿菌丝体混合、萃取，以得到浓缩液；和g)向该浓缩液中加入饱和一元醇，析出、过滤结晶得到纯β-胡萝卜素。本发明的β-胡萝卜素的含量达96％以上，收率在85％。

主权项

一种通过三孢布拉霉发酵生产并提纯β‑胡萝卜素的方法，所述方法包括以下步骤：a)将三孢布拉霉(Blakeslea trispora)“+”“‑”菌株分别接种到PDA培养基上，在25‑30℃条件下培养48‑60小时，待大量长出孢子后用无菌生理盐水洗脱孢子成孢子悬浮液；b)上述新鲜孢子悬浮液中的孢子在种子罐中在pH＝6.3～6.8和培养温度25‑30℃下培养繁殖成发酵用种子；其中的种子培养基组成包括：玉米淀粉、葡萄糖、植物油、盐酸硫胺素、硫酸镁、乳化剂；c)将步骤b)的种子罐中所述发酵用种子接种到发酵罐中在pH＝6.5～6.8和培养温度27‑30℃下发酵培养生成发酵液；其中，接种前培养基经过胶体磨高速剪切乳化，发酵罐的培养基组成包括：玉米淀粉、玉米浆、粕饼粉、植物油、磷酸氢二钾、硫酸镁、盐酸硫胺素、和/或乳化剂；d)向步骤c)的所述发酵液中用有机碱或无机碱调节发酵液为碱性pH＝8.0～8.5，过滤得到湿菌丝体；e)在温度0℃～60℃下用疏水性非极性有机溶剂处理步骤d)的湿菌丝体，浸提、连续压滤后得到去除脂溶性杂质的湿菌丝体；f)用酯类有机溶剂与步骤e)的湿菌丝体在温度10℃到溶剂沸点温度下混合、萃取，温度不超过40℃下真空浓缩至干，以得到浓缩液；和g)在温度10℃～80℃下向该浓缩液中加入C1～C6饱和一元醇， 析出结晶、过滤结晶得到纯β‑胡萝卜素。