[发明专利]基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系及其制备方法

摘要

本发明属微生物动物细胞系领域，涉及一种基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，尤其涉及一种高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT及其制备方法。本发明将HBV真核表达质粒pREP-HBV-WT转染HepG2细胞后，通过潮霉素筛选，检测细胞中HBV复制、特异性抗原的表达及病毒颗粒的产生，获得高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT；所述的细胞株其表达HBsAg、HBeAg水平明显高于HepG2.2.15，表达水平稳定，受培养环境等因素影响少，整合的HBV基因型为B或C基因型，所述的细胞对LAM及ADV均敏感，HBV胞内复制水平随LAM及ADV浓度上升逐步下降。本发明的基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，可用于中国人群HBV发病或耐药机制的研究和可用于筛选抗HBV药物。

主权项

基于HepG2稳定表达HBV野生株细胞系，其特征在于，所述细胞系为高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株，保藏编号：CGMCC No.4909，分类命名：高表达野生型HBV病毒肝癌细胞株HepG2.HSWT；具有以下生物学特性：能持续表达HBsAg及HBeAg，胞内有HBV复制，并产生HBV颗粒；与Hep2.2.15相比，其表达HBsAg及HBeAg高于Hep2.2.15，细胞上清HBV颗粒水平与Hep2.2.15基本持平，其整合的HBV基因型为B或C基因型；其对LAM及ADV均敏感；HBV胞内复制水平随LAM及ADV浓度上升逐步下降。