[发明专利]一种检测调节性T细胞免疫抑制功能的方法无效
| 申请号： | 201110161298.0 | 申请日： | 2011-06-15 |
| 公开（公告）号： | CN102288587A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 顾鹏 | 申请（专利权）人： | 顾鹏 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种检测调节性T细胞免疫抑制功能的方法，其中该方法步骤包括：纯化CD4+T细胞并用PBS磷酸盐缓冲液洗涤；107CD4+T细胞重悬于500μl预热的PBS磷酸盐缓冲液中；加入等体积CFSE羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂，预热PBS磷酸盐缓冲液5μM，CFSE羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂终浓度为2.5μM；室温孵育2分钟；加入等体积的胎牛血清，室温孵育1分钟；完全培养基洗涤3次，重新计数，加入96孔板培养5天；本发明的有益效果：安全，标记的荧光可以维持长达数周之久；可以追踪细胞在体内的分裂增殖过程；相关性高；特定跟踪操作简单，可靠；稳定，结果客观，费用经济，效率高。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 调节 细胞 免疫抑制 功能 方法 | ||
【主权项】：
一种检测调节性T细胞免疫抑制功能的方法，其中该方法步骤包括：1)纯化CD4+T细胞并用PBS磷酸盐缓冲液洗涤；2)107CD4+T细胞重悬于500μl预热的PBS磷酸盐缓冲液中；3)加入等体积CFSE羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂，预热PBS磷酸盐缓冲液5μM，CFSE羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂终浓度为2.5μM；4)室温孵育2分钟；5)加入等体积的胎牛血清，室温孵育1分钟；6)完全培养基洗涤3次，重新计数，加入96孔板培养5天；7)加入调节性T细胞，第5天时根据CFSE羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂的强弱检测其对反应细胞的抑制能力。
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