[发明专利]一种猪瘟病毒强毒Shimen株和疫苗弱毒C株RT-PCR鉴别检测方法无效
| 申请号： | 201110165439.6 | 申请日： | 2011-06-20 |
| 公开（公告）号： | CN102230030A | 公开（公告）日： | 2011-11-02 |
| 发明（设计）人： | 郭抗抗;张彦明;宁蓬勃;刘伟;王晶钰 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | 本发明公开了猪瘟病毒强毒(CSFV)Shimen株和疫苗弱毒C株RT-PCR鉴别检测方法，包括以下步骤：(1)合成引物：CSFV强毒的检测引物CSFV-S-F/CSFV-S-R，CSFV弱毒的检测引物为CSFV-C-F/CSFV-C-R；(2)提取病毒RNA、合成cDNA模板；(3)PCR扩增，可从弱毒模板中扩增出1条256bp的条带；可从强毒模板中扩增出1条428bp的条带。该方法只需要在反转录之后进行一次PCR，适合一般实验室开展进行猪瘟病毒强毒和弱毒的鉴别检测，可以有效减少免疫未感染猪被误杀，而产生一定的经济效益。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 猪瘟 病毒 shimen 疫苗 rt pcr 鉴别 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种猪瘟病毒强毒Shimen株和疫苗弱毒C株RT‑PCR鉴别检测方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)合成引物，参照GenBank收录的CSFV基因组序列，通过MegAlign软件对其序列进行了比较，在高度保守和强弱毒株有明显差异的区段设计引物：CSFV强毒的检测引物为CSFV‑S‑F/CSFV‑S‑R：上游引物(CSFV‑S‑F)：5’‑CAGAAACATCAAATAC‑3’(10666‑10681)；下游引物(CSFV‑S‑R)：5’‑CGTCGGCACAGATT‑3’(11093‑11080)；CSFV弱毒的检测引物为CSFV‑C‑F/CSFV‑C‑R：上游引物(CSFV‑C‑F)：5’‑CATGGAGGCGCTGGCA‑3’(7532‑7547)；下游引物(CSFV‑C‑R)：5’‑CACAAATTTCCTTCCGTCT‑3’(7796‑7778)；(2)提取病毒RNA、合成cDNA模板；(3)PCR扩增，可从弱毒模板中扩增出1条256bp的条带；可从强毒模板中扩增出1条428bp的条带。
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