[发明专利]利用锌指核酸酶敲除牛肌肉抑制素基因的方法有效
申请号: | 201110174000.X | 申请日: | 2011-06-24 |
公开(公告)号: | CN102260711A | 公开(公告)日: | 2011-11-30 |
发明(设计)人: | 于胜利;罗俊杰;丁方荣;李松;汤波;李宁 | 申请(专利权)人: | 北京济福霖生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N5/10;C12N15/877;A01K67/027 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 王加岭;张庆敏 |
地址: | 100193 北京市海淀*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | 本发明提供了一种利用锌指核酸酶敲除牛肌肉抑制素基因(Myostatin)的方法,其是根据牛肌肉抑制素基因序列,设计ZFNs特异位点表达载体并转入牛的成纤维细胞中,获得肌肉抑制素基因敲除的细胞。利用ZFNs介导的基因敲除,可以实现一次转染,得到双等位基因敲除的细胞克隆,这在常规基因打靶过程中是难以实现的,省去了药物筛选过程,有利于细胞单克隆的形成,避免了细胞需要对抗药物毒害的过程,对于后续的体细胞核移植和胚胎的发育质量起到了关键作用,同时不含有抗性基因,大大简化了生物安全评价过程。 | ||
搜索关键词: | 利用 核酸酶 肌肉 抑制 基因 方法 | ||
【主权项】:
一种利用锌指核酸酶敲除牛肌肉抑制素基因的方法,其是根据牛肌肉抑制素基因序列,设计ZFNs特异位点表达载体并转入牛的成纤维细胞中,获得肌肉抑制素基因敲除的细胞,其特征在于,设计特异的锌指结合蛋白酶ZFNs,其作用的DNA序列为:ZFNs‑Set1:GTCATTACCATGCCCACGGAGTGTGAGTAGTCCTGCTGGT。
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