[发明专利]控制红刺玫花色的二氢黄酮醇4-还原酶基因序列及其克隆方法

摘要

控制红刺玫花色二氢黄酮醇4-还原酶基因序列及其克隆方法，属于基因的克隆技术及其序列分析技术领域，是涉及红刺玫二氢黄酮醇4-还原酶基因的克隆方法及其编码蛋白质应用技术。其要点是该基因在红刺玫花内存在至少两个，均具有一个完整的基因编码区域；该基因的核苷酸序列是附录1所示；所编码的蛋白质序列是附录2所示；改变134位氨基酸的组成是改变红刺玫花色的必要条件。其克隆方法，包含以下步骤：设计两个引物，提取红刺玫花苞，引物参与，进行PCR反应，对红刺玫DFR基因进行PCR扩增并琼脂糖凝胶电泳检测实施。本发明后的积极效果是：为改变红刺玫的单一花色弊端创造了条件，利用克隆技术创造出红刺玫新的花色，为城市绿化美容创造了条件。

主权项

控制红刺玫花色的二氢黄酮醇4‑还原酶基因序列，其特征在于：该基因在红刺玫花内存在至少两个，均具有一个完整的基因编码区域；该基因的核苷酸序列是附录1所示；所编码的蛋白质序列是附录2所示；其碱基序列和氨基酸序列显示红刺玫中DFR与NADP结合位点“TASAG SVNVEETQKP VYNESNWSDV EF”和“TSSAG TVNVEETQKP VYNESNWSDV EF”是高度保守的底物结合区，结合区中的第134位氨基酸直接影响酶的底物特异性；红刺玫DFR基因编码的氨基酸序列显示，其DFR高度保守的底物结合区是134位是名为天冬酰胺的N，其DFR酶的底物为DHK或者为DHQ；催化生成花葵素‑3‑葡萄糖苷或者为花青素‑3‑葡萄糖苷，显现出砖红色或者红色；改变134位氨基酸的组成是改变红刺玫花色的必要条件。