[发明专利]一种止咳片的快速薄层鉴别与三成分同时定量测定方法

摘要

本发明涉及一种止咳片的快速薄层鉴别与三成分同时定量测定方法。其特征在于：用薄层色谱法在5块薄层板上对制剂中的前胡、黄芩、麻黄、枇杷叶、金银花、苦杏仁和桔梗进行了鉴别。方法简便、快捷，前6项鉴别只需样品2g，甲醇23ml，展开剂40ml，时间2小时。用HPLC法，对制剂中的盐酸麻黄碱、伪麻黄碱和苦杏仁苷进行了同时定量测定，快捷的前处理技术，有效排除了干扰，使三成分的同时定量测定基线平稳，待测定波峰重现性良好。快速薄层鉴别和三成分的同时定量测定构成了一部高水准的药品质量标准，不但可多指标控制药品质量，与常规方法相比，提高检测效率3倍，节省时间3/4，降低成本80％，减少环境污染90％。

主权项

本发明涉及一种止咳片的快速薄层鉴别与三成分同时定量测定方法，其特征在于：(1)快速薄层鉴别方法①取止咳片，除去包衣，研细，称取2g，加甲醇4ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取前胡、黄芩和麻黄对照药材各0.1～0.3g，分别加甲醇1～3ml，超声处理10分钟，上清液作为对照药材溶液；吸取供试品溶液8～10μl，对照药材溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为20∶4∶0.5的氯仿‑甲醇‑浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与前胡对照药材色谱相应的位置上，至少显三个相同的荧光斑点；置紫外光灯254nm下检视，在与黄芩对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；喷以2％的茚三酮无水乙醇溶液，100℃烘烤至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与麻黄对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；②取枇杷叶对照药材0.1～0.3g，分别加甲醇1～3ml，超声处理10分钟，上清液作为对照药材溶液；吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为7.5∶2.5∶0.15的环己烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，100℃烘烤至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点；③取金银花对照药材0.1～0.2g，加甲醇1～3ml，超声处理10分钟，上清液作为对照药材溶液；吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5～6μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为15∶5∶5的乙酸丁酯‑甲酸‑水的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，100℃烘烤约5分钟，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；④取苦杏仁对照药材0.2～0.5g，加甲醇2～4ml，超声处理10分钟，上清液作为对照药材溶液；吸取鉴别①项下的供试品溶液和对照药材溶液各5～8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比为15∶2∶0.1的环己烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2％磷钼酸乙醇溶液，100℃烘烤至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，至少显2个相同颜色斑点；⑤取止咳片，除去包衣，研细，称取3g，加热水25ml，超声使溶解，棉花滤过，滤液加盐酸2ml，沸水浴中加热30分钟，冷却，加乙酸乙酯20～25ml，萃取，乙酸乙酯层蒸干，残留物加甲醇1ml，使溶解，作为供试品溶液；另取桔梗对照药材0.5～0.8g，加热水20ml、盐酸2ml，沸水浴中加热30分钟，冷却，棉花滤过，滤液加乙酸乙酯15～20ml，萃取，乙酸乙酯层蒸干，残留物加甲醇1ml，使溶解，作为对照药材溶液；吸取供试品溶液5～8μl，对照药材溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为4∶1∶4∶1的氯仿‑乙酸乙酯‑甲醇‑浓氨为展开剂，展开，取出，晾干，喷以体积比为1∶6的5％香草醛硫酸溶液∶乙醇的混合溶液，热风吹至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；(2).三成分同时定量测定方法A.色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为4.5∶9∶86.5的乙腈‑甲醇‑0.1％磷酸为流动相；检测波长207nm；理论板数按苦杏仁苷峰计算不低于1500；B.对照品溶液制备取盐酸麻黄碱和苦杏仁苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成储备液，在取储备液适量，加70％甲醇制成每1ml含盐酸麻黄碱12μg、苦杏仁苷35μg的混合溶液，作为对照品溶液；再取盐酸伪麻黄碱适量，加70％甲醇制成每1ml含盐酸伪麻黄碱5μg的溶液，作为定位溶液；C.供试品溶液制备取止咳片20片，除去包衣，精密称定，研细，取0.3～0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加70％甲醇15～25ml，密塞，称定重量，以功率250w、频率40kHz，超声处理15分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续溶液2ml，置装有100‑120目中性氧化铝1～1.5g的内径1cm的色谱柱上，用70～80％甲醇洗脱至10ml的量瓶中至约9ml，加1滴磷酸，用70～80％的甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜，滤过，取续滤液作为供试品溶液；D.测定法分别精密吸取对照品溶液与定位溶液各8～10μl、供试品溶液10～15μl，注入液相色谱仪，以盐酸伪麻黄碱确认保留时间，以盐酸麻黄碱计算含量；本品每片含麻黄以盐酸麻黄碱计，盐酸麻黄碱和盐酸伪麻黄碱总量，不得低于0.7mg，含苦杏仁以苦杏仁苷计不得低于2.7mg。