[发明专利]一种布朗灵芝子实体的人工栽培方法

摘要

本发明涉及一种布朗灵芝子实体的人工栽培方法，其特征是通过将新鲜布朗灵芝(Ganoderma brownii(Murrill)Gilb.)子实体进行组织分离或孢子分离，然后在PDA斜面培养基和斜面综合PDA培养基上培养得到生产用母种，再接种到原种培养基中培养得到原种，其后经过生产种培养基的培养得到生产种，最后将生产种接种到生产用栽培基中，培养至长出成熟的子实体。本发明的人工栽培方法可以使布朗灵芝子实体的生物效率达到30％～90％，即每100g生产用培养料可得30g～90g新鲜的布朗灵芝子实体，可作原料或作研究材料使用。

主权项

一种布朗灵芝子实体的人工栽培方法，其特征包括以下的步骤：(1)将布朗灵芝(Ganoderma brownii(Murrill)Gilb.)的新鲜子实体进行组织分离，然后按培养基质量2％～5％接种量接种到斜面PDA培养基，于22～35℃、湿度50％～75％时培养10～30d，至菌丝长满斜面，挑取长势旺盛、粗壮均一的作为母种于4℃保藏备用或进一步培养，所述的斜面PDA培养基的pH是6～8，其原料组成按质量份计，为已去皮去芽眼的马铃薯75～85份，蔗糖6～10份，琼脂6～10份和松针3～5份，并通过下述方法制得：原料按所述组成分别称重后，先将马铃薯切成小条再与松针放入锅中，加入原料组成总质量3.5～4.5倍的水，煮沸20～30分钟至马铃薯软而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补至原加水量后，加入琼脂熔化，再加入蔗糖搅拌均匀，趁热装于试管灭菌后，冷却到45～50℃倒成斜面备用；(2)将步骤(1)得到的母种按培养基质量2％～10％的接种量接种至斜面综合PDA培养基中继续培养或复壮，于22～35℃，湿度50％～75％时培养10～30d，直至菌丝长满斜面，选取长势旺盛、粗壮均一的作为生产用母种，所述的斜面综合PDA培养基的pH是6～8，其原料组成按质量份计，为已去皮去芽眼的马铃薯75～85份，蔗糖6～10份，琼脂6～10份，磷酸二氢钾0.2～1.5份，硫酸镁0.2～1.5份和VB10.002～0.006份，并通过下述方法制得：原料按所述组成分别称重后，先将马铃薯切成小条放入锅中，加入原料组成总质量3.5～4.5倍的水，煮沸20～30分钟至马铃薯软而不烂时，用6～8层纱布过滤，取滤汁于锅中，补至原加水量后，加入琼脂熔化，再加入蔗糖、磷酸二氢钾、硫酸镁和VB1搅拌均匀，趁热装于试管灭菌后，冷却到45～50℃倒成斜面备用；(3)步骤(2)得到的生产用母种按培养基质量3％～10％的接种量接种至原种培养基中，于22～35℃，湿度50％～75％时，培养20～50d，直至菌丝长满原种培养基，选取长势旺盛、粗壮均一的作为生产原种，所述的原种培养基由栽培基料和水按质量比1∶1.1～1.4组成，所述的栽培基料按总质量分数100％计，由玉米芯30％～50％，木屑20％～40％，麸皮或米糠20％～30％，蔗糖1％～5％和石膏粉1％～3％组成；(4)将步骤(3)得到的生产原种按培养基质量3％～10％的接种量接种至生产种培养基中，于22～35℃，湿度50％～75％时，培养20～50d，直至菌丝长满生产种培养基，得到布朗灵芝生产种，所述的生产种培养基由栽培基料和水按质量比1∶1.1～1.4组成，所述的栽培基料按总质量分数100％计，由玉米芯30％～50％，木屑20％～40％，麸皮或米糠20％～30％，蔗糖1％～5％和石膏粉1％～3％组成；(5)将步骤(4)得到的生产种按培养基质量5％～15％的接种量接种至生产用栽培基中，于温度22～35℃，相对湿度50％～85％的培菌房中，黑培养40～60d，至菌丝充满生产用栽培基料，则可移入栽培房，所述的生产用栽培基由栽培基料和水按质量比1∶1.1～1.4组成，所述的栽培基料按总质量分数100％计，由玉米芯30％～50％，木屑20％～40％，麸皮或米糠20％～30％，蔗糖1％～5％和石膏粉1％～3％组成；(6)将步骤(5)获得的长满菌丝的栽培基料，在10～15℃培养3～5d直至出现白色状高1cm的原基，原基在温度20～35℃，相对湿度75％～90％，散射光光照强度100～1000lx，每天通风1～2次，每次0.5～1小时的条件下培育至长出菌柄，然后保持湿度85％～98％，每天通风2～3次，每次0.5～1小时的条件下菌盖逐渐分化，室内光照强度增强到1000～2000lx，温度20～35℃，全天通风，使菌盖和菌柄颜色加深，菌盖边缘浅色生长线消失，开始释放孢子，加大室内光照强度到2000～5000lx，继续培养5～10天，菌盖颜色进一步加深，则得到布朗灵芝子实体。