[发明专利]一种提高牛腔前卵泡体外发育的培养基及其应用

摘要

本发明公开了一种提高牛腔前卵泡体外发育的培养基及其应用。本发明提供制备促进离体哺乳动物腔前卵泡体外发育的培养基的方法，为将胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、丙酮酸钠、谷氨酰胺、次黄嘌呤、血清、促卵泡素、促黄体素、雌激素、PTEN抑制剂和α-MEM培养基混合，得到培养基。本发明的实验证明，本发明首先从卵巢皮质分离牛腔前卵泡，随后将获取的卵泡在本发明提供的培养基和对照培养基中进行体外培养，观察其直径增长以及卵泡的成腔率，结果发现，本发明提供的培养基培养得到成腔率和直径增长值均高于对照，为进一步挖掘雌性生殖资源提供必要的培养体系。

主权项

一种制备促进离体哺乳动物腔前卵泡体外发育的培养基的方法，为将胰岛素、转铁蛋白、亚硒酸钠、丙酮酸钠、谷氨酰胺、次黄嘌呤、血清、促卵泡素、促黄体素、雌激素、PTEN抑制剂、水和α‑MEM培养基混合，得到培养基，所述胰岛素在所述培养基中的浓度为5ug/ml，所述转铁蛋白在所述培养基中的浓度为5ug/ml，所述亚硒酸钠在所述培养基中的浓度为5ng/ml；所述丙酮酸钠在所述培养基中的浓度为(0.21‑0.29)mmol/l，所述谷氨酰胺在所述培养基中的浓度为(1.5‑2.0)mmol/l，所述次黄嘌呤在所述培养基中的浓度为(1.8‑2.5)mmol/l，所述血清在所述培养基中的浓度为5％‑10％(体积百分含量)，所述促卵泡素在所述培养基中的浓度为0.25μg·ml‑1‑0.5μg·ml‑1，所述促黄体素在所述培养基中的浓度为5IU ml‑1‑10IUml‑1，所述雌激素在所述培养基中的浓度为0.5μg·ml‑1‑1.0μg·ml‑1，所述PTEN抑制剂在所述培养基中的浓度为100nmol/L‑10μmol/L，所述α‑MEM培养基在所述培养基中的浓度为10.1g/L。