[发明专利]一种丙型肝炎病毒基因的克隆方法无效
申请号: | 201110205242.0 | 申请日: | 2011-07-21 |
公开(公告)号: | CN102250885A | 公开(公告)日: | 2011-11-23 |
发明(设计)人: | 蔡庆贤;高志良;赵志新;张晓红;林潮双;邓洪 | 申请(专利权)人: | 中山大学附属第三医院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 广州嘉权专利商标事务所有限公司 44205 | 代理人: | 谭英强 |
地址: | 510630 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明公开了一种丙型肝炎病毒基因的克隆方法,包括从血清样品中提取HCV的RNA;将提取得到的RNA反转录得到cDNA;使用反转录得到cDNA为模板,引物进行巢式PCR,扩增丙肝病毒的core、NS5B基因片段。本发明方法的扩增效率高,对病毒滴度>1000IU的HCV能够达到95%的扩增效率,病毒滴度<1000IU时core基因片段的扩增效率能够达到60%。 | ||
搜索关键词: | 一种 肝炎 病毒 基因 克隆 方法 | ||
【主权项】:
一种丙型肝炎病毒基因的克隆方法,包括以下步骤:1)从血清样品中提取HCV的RNA;2)将提取得到的RNA反转录得到cDNA;3)使用反转录得到cDNA为模板,引物P1:ACTGCCTGATAGGGTGCTTGC(SEQ ID NO:1), P2:ATGTACCCCATGAGGTCGGC(SEQ ID NO:2)、P3:AGGTCTCGTAGACCGTGCA(SEQ ID NO:3)、P4:CATGTGAGGGTATCGATGAC(SEQ ID NO:4)和P5: TATGAYACCCGYTGCTTTGAC(SEQ ID NO:5)、P6:GAGGAGCAAGATGTTATCAGCTC(SEQ ID NO:6)、P7:TATGAYACCCGYTGCTTTGAC(SEQ ID NO:7)和P8: GAATACCTGGTCATAGCCTCCG(SEQ ID NO:8)分别进行巢式PCR,扩增丙肝病毒的core和NS5B基因片段。
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