[发明专利]荷叶离褶伞菌丝体中试发酵工艺

摘要

本发明公开一种荷叶离褶伞菌丝体中试发酵工艺。在荷叶离褶伞菌丝体摇瓶发酵条件研究结果的基础上，采用均匀设计，在200L发酵罐中，对荷叶离褶伞菌丝体中试发酵条件与培养基配方进行了优化研究，结果表明荷叶离褶伞中试发酵的最佳条件为：搅拌转速160r/min、罐压0.2MPa、通气量80L/h、pH 6.5、温度20℃、接种量10％；最佳培养基配方为：玉米面5％、大豆0.5％、；麸皮5％、0.025％ZnSO4、0.05％MgSO4、0.05％KH2PO4。发酵至第8d菌丝体生物量达到10.578g/L，第9d胞外多糖(Exopolysaccharides，EPS)产量1.212g/L。

主权项

一种荷叶离褶伞菌丝体中试发酵工艺，其步骤是：a.供试菌种荷叶离褶伞菌种由河西学院食用菌研究所提供，菌种保藏在“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”，菌种保藏号CGMCC No.1518，菌株号ZY48‑1，专利号：ZL200510096405.0；b.液体菌种培养基的制备将玉米面加水调制成悬液，加入0.1％淀粉酶，于70℃水浴锅中酶解5h；大豆先用水浸泡24h，用豆浆机打浆，加入0.1％蛋白酶，于55℃水浴锅中酶解5h；然后将玉米面、大豆混合液，过300目筛，加水定容；c.液体菌种培养将供试试管菌种置于22℃恒温箱内活化24h，接入100mL/250mL三角瓶中，置于22℃、转速120r/min的恒温摇床上，连续培养7d，将该菌种接入20L液体菌种培养罐中，接种量10％，恒温22℃、通气量20L/h，连续培养7d获得液体菌种；d.荷叶离褶伞菌丝生产将b步骤玉米面、大豆、麸皮的水解过滤液加入200L发酵罐，加水定容至150L，然后加入ZnSO4、MgSO4、KH2PO4和PPE聚醚消泡剂，121℃灭菌1h，冷却至25℃，接入10％的液体菌种，搅拌，转速为160r/min、罐压0.2MPa、通气量80L/h、pH 6.5、温度20℃的培养条件，连续培养，于接菌后第2天开始，每天测定菌丝体菌丝体生物量(g/L)和胞外多糖产量(g/L)，直第8d。