[发明专利]一种用于胚胎注射转染的沃尔巴克氏体（Wolbachia）的提取方法

摘要

本发明公开一种用于胚胎注射转染的沃尔巴克氏体(Wolbachia)的提取方法。它是将解剖含有沃尔巴克氏体的昆虫，获得其卵巢，置于SPG缓冲液中；再将卵巢匀浆，用SPG缓冲液冲洗收集，然后置于离心机中离心100g～1000g，1min～10min，取上清再离心5000g～15000g，5～20min，去除上清，沉积物再用SPG缓冲液冲悬，再离心100g～1000g，1min～10min，取上清，即得到纯化的沃尔巴克氏体，该纯化的沃尔巴克氏体即可用于蚊子的胚胎注射。本发明的方法中沃尔巴克氏体的来源(含有沃尔巴克氏体的昆虫卵巢组织)丰富，并且容易获取，整个方法操作简便，可控性极强，非常容易在规定的时间内获取大量的沃尔巴克氏体用于胚胎注射转染，从而节省了大量的时间和精力，提高了工作效率，有利于迅速的建立转染有沃尔巴克氏体的蚊株。

主权项

一种用于胚胎注射转染的沃尔巴克氏体(Wolbachia)的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)：昆虫卵巢的制备：解剖含有沃尔巴克氏体的昆虫，获得其卵巢，置于SPG缓冲液中；(2)：将卵巢匀浆，用SPG缓冲液冲洗收集，然后置于离心机中离心100g～1000g，1min～10min，取上清再离心5000g～15000g，5～20min，去除上清，沉积物再用SPG缓冲液冲悬，再离心100g～1000g，1min～10min，取上清，即得到纯化的沃尔巴克氏体，该纯化的沃尔巴克氏体即可用于蚊子的胚胎注射。