[发明专利]一种培育抗黄瓜花叶病毒植物的方法无效
| 申请号： | 201110232449.7 | 申请日： | 2011-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN102286525A | 公开（公告）日： | 2011-12-21 |
| 发明（设计）人： | 刘迪秋;田荣欢;贺欣;饶健;葛锋;陈朝银;周阿涛;丁为群 | 申请（专利权）人： | 昆明理工大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/113;A01H5/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 650093 云*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种培育抗黄瓜花叶病毒植物的方法。本发明克隆黄瓜花叶病毒的复制酶基因1a的cDNA片段，长344bp，位于CMV1a全长基因序列的1673bp-2016bp之间，并将这个基因片段构建到RNAi高通量表达载体pHellsgate2上，再通过根癌农杆菌介导的遗传转化法将RNAi植物表达载体导入烟草中并稳定表达，最后获得抗病毒的烟草植株；通过实验证实在植物中表达病毒基因片段的双链RNA能诱发RNA干涉的发生，进而产生相应基因的小干涉RNA，并特异性的抑制病毒的侵染，筛选的转基因烟草对黄瓜花叶病毒侵染具有明显的抗性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 培育 黄瓜花叶病毒 植物 方法 | ||
【主权项】：
一种培育抗黄瓜花叶病毒植物的方法，其特征在于具体操作如下：(1) 从感染黄瓜花叶病毒的植物组织中克隆CMV 1a基因的cDNA片段；(2) 将克隆的cDNA片段与RNAi高通量植物表达载体pHellsgate2进行BP重组反应，构建CMV 1a RNAi植物表达载体；(3) 将构建的CMV 1a的RNAi植物表达载体通过根癌农杆菌介导转入目标植物中；(4) 以重组载体T‑DNA上具有的抗性标记筛选转化子，并通过聚合酶链式反应获得真正的转基因植株，接种黄瓜花叶病毒，最后筛选出对黄瓜花叶病毒抗性明显增强的转基因植株。
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