[发明专利]一种检测非编码小RNA的方法有效
申请号: | 201110235252.9 | 申请日: | 2011-08-17 |
公开(公告)号: | CN102952848A | 公开(公告)日: | 2013-03-06 |
发明(设计)人: | 高丰厚;郭跃辉;姜斌 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属第三人民医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;G01N27/447 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 王敏杰 |
地址: | 201900 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供了一种检测非编码小RNA的方法,寡核苷酸序列探针在末端转移酶作用下3’末端标记非同位素;将已标记探针和样品RNA置于液相杂交环境充分反应使样品中目的非编码小RNA和探针形成杂化双链。之后将杂交产物用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,分离结合为双链的RNA-探针和未杂交的过量探针,之后在转移至尼龙膜,经紫外线交联固定,加入链霉亲和素-HRP即可显色发光。在体系中,杂交后的目的RNA-探针与单一未杂交探针均能通过链霉亲和素-HRP,加入酶底物发出荧光条带,在X线光片显影。 | ||
搜索关键词: | 一种 检测 编码 rna 方法 | ||
【主权项】:
一种检测非编码小RNA的方法,其特征在于,步骤包括:步骤1,在寡核苷酸探针的3’末端标记非同位素;步骤2,将已标记非同位素的探针与样品RNA置于液体杂交环境中,使非编码小RNA和所述探针进行液相杂交形成杂化双链,分离所述杂化双链;步骤3,定量或定性检测所述小RNA。
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