[发明专利]一种高效诱导棉花体胚发生与植株再生的方法及其培养基

摘要

本发明公开了一种高效诱导棉花体胚发生与植株再生的方法及其培养基。本发明的培养基为用于棉花体细胞再生植株的成套培养基，由培养基A、培养基B和培养基C组成，所述培养基A由改良MS基本培养基、激素、葡萄糖和凝固剂组成；所述培养基B由改良MS基本培养基、激素、葡萄糖和氨基酸添加物组成；所述培养基C由改良MS基本培养基、激素、葡萄糖、氨基酸添加物和凝固剂组成；本发明的方法是使用所述成套培养基，将棉花愈伤组织培养成再生植株的方法。本发明不受棉花基因型的限制，且培养周期短、重复性高，使棉花具高效获得大量体细胞胚胎与植株再生的能力，从而为棉花的细胞工程、基因工程以及棉花遗传改良等相关研究提供重要平台。

主权项

用于获得棉花体细胞再生植株的成套培养基，由独立包装的培养基A、培养基B和培养基C组成；所述培养基A为由改良MS基本培养基、激素、葡萄糖和凝固剂组成的培养基；所述培养基B为由所述改良MS基本培养基、激素、葡萄糖和氨基酸添加物组成的培养基；所述培养基C为由所述改良MS基本培养基、激素、葡萄糖、氨基酸添加物和凝固剂组成的培养基；所述改良MS基本培养基由下述质量份的营养成分组成：NH4NO3 825份、KNO3 3800份、KH2PO4 170份、CaCl2·2H2O 440份和MgSO4·7H2O370份；KI 0.83份、Na2MoO4·2H2O 0.25份、H3BO3 6.2份、CuSO4·5H2O 0.025份、MnSO4·4H2O 22.3份、CoCl2·6H2O 0.025份和ZnSO4·4H2O 8.6份；Na2EDTA 37.3份和FeSO4·7H2O 27.8份；烟酸0.5份、肌醇100份、盐酸硫胺素0.1份、盐酸吡哆素0.5份和甘氨酸2.0份；所述激素为吲哚丁酸和激动素，所述吲哚丁酸和所述改良MS基本培养基在所述培养基A、培养基B和培养基C中的配比满足0.3份‑1.0份所述吲哚丁酸/825份NH4NO3；所述激动素和所述改良MS基本培养基在所述培养基A、培养基B和培养基C中的配比满足0.05份‑0.3份所述激动素/825份NH4NO3；所述吲哚丁酸与所述激动素在所述培养基A、培养基B和培养基C中的质量份之比均为(7.00‑3.00)∶1；所述葡萄糖和所述改良MS基本培养基在所述培养基A、培养基B和培养基C中的配比满足25000份‑35000份所述葡萄糖/825份NH4NO3；所述氨基酸添加物为谷氨酰胺和天冬氨酸，所述谷氨酰胺和所述改良MS基本培养基在所述培养基B和培养基C中的配比满足300份‑700份所述谷氨酰胺/825份NH4NO3；所述天冬氨酸和所述改良MS基本培养基在所述培养基B和培养基C中的配比满足300份‑700份所述天冬氨酸/825份NH4NO3。