[发明专利]一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法

摘要

本发明属于生物发酵领域，涉及一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法，将天蚕素抗菌肽基因质粒转化的枯草芽孢杆菌在合适的培养基和培养条件下，表达天蚕素抗菌肽基因并分泌天蚕素抗菌肽到菌体外，发酵液天蚕素抗菌肽的有效成分含量为≥1.5mg/ml，该方法生产的天蚕素抗菌肽杀菌效价高，生产工艺简便，质量稳定，可规模生产，优化养殖生态环境，生产周期短且成本低。

主权项

一种枯草芽孢杆菌发酵生产天蚕素抗菌肽的方法，包括：（1）摇瓶培养：按照配方配制1.5L培养基，平均分装于20个1000ml三角烧瓶中，高温灭菌冷却后，用试管菌种接种，接种量1：500，摇床培养，搅拌速度为225rpm/min， 温度37℃， 培养时间12小时；培养基配方为：蛋白胨   15g酵母提取物  7.5g食盐       7.5g用蒸馏水定容至1.5L； （2）发酵罐发酵：按照配方配制20m3培养基，高温灭菌冷却至37℃，移种量1:70，pH 5.5～6.0，温度37℃，补料前通气量0.6：1、补料后通气量0.8：1、补料8小时后至放罐通气量1.2：1，搅拌速度为80～90 rpm/min，每2小时取样检测，OD600在0.6～1时补料，整体发酵时间为24～26小时，培养基配方为：玉米：3%豆粕：1.8%蛋白胨：1%硫酸铵：1%葡萄糖：0.3%磷酸二氢钾： 0.3%麦芽糖： 5.5%消泡剂： 0.02%。