[发明专利]一种益生菌发酵蓝莓果浆粉的制备方法

摘要

本发明提供了一种益生菌发酵蓝莓果浆粉的制备方法。以鼠李糖乳杆菌，副干酪乳杆菌副干酪亚种，嗜酸乳杆菌，酿酒酵母，产朊假丝酵母五株益生菌为出发菌株，经扩大培养、粉末冻干菌种制备、复合益生菌发酵剂冻干粉的复配，获得复合益生菌发酵剂冻干粉。将浓缩蓝莓果浆按其重量的5％添加白砂糖后，经臭氧杀菌，按加糖浓缩果浆固形物重量的0.025％接种复合益生菌发酵剂冻干粉，30℃静止保温发酵48小时，冷冻干燥后获得益生菌发酵蓝莓果浆粉。

主权项

一种益生菌发酵蓝莓果浆粉的制备方法，其特征是按下述方法制备：1)益生菌的选择及培养基的制备A菌——鼠李糖乳杆菌CICC6162(Lactobacillus rhamnosus)，培养基为：蛋白胨2g，酵母提取物1g，大豆蛋白胨1g，蛋白质酶解物No.3(Difco)1g，5％柠檬酸铁2ml，人工海水700ml，蒸馏水300ml，pH 7.5，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃备用。B菌——副干酪乳杆菌副干酪亚种CICC22812(Lactobacillus paracasei subsp.paracasei)，培养基为：酪蛋白胨10.0g，牛肉膏10.0g，酵母粉5.0g，葡萄糖5.0g，乙酸钠5.0g，柠檬酸二胺2.0g，Tween 801.0g，K2HPO42.0g，MgSO4.7H2O 0.2g，MnSO4.H2O 0.05g，CaCO320.0g，蒸馏水1.0L，pH6.8，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃备用。C菌——嗜酸乳杆菌CICC6093(Lactobacillus acidophilus)培养基为：酪蛋白胨10g/L，肉汤提取物10g/L，酵母提取物5g/L，葡萄糖20g/L，吐温801g/L，K2HPO42g/L，醋酸钠5g/L，柠檬酸二铵2g/L，MgSO4.7H2O 0.2g/L，MnSO4.H2O 0.05g/L，pH 6.2‑6.5，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃备用。D菌——酿酒酵母CICC31447(Saccharomyces cerevisiae)培养基为：5°Bé麦芽汁，pH 6.2‑6.5，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃备用。E菌——产朊假丝酵母CICC31126(Candida utilis)培养基为：5°Bé麦芽汁，pH 6.2‑6.5，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃备用。2)原菌种活化分别量取0.9％的生理盐水10ml于5只试管内，经121℃灭菌20分钟冷却至30℃，将5株益生菌安瓶内的冻干菌粉末在无菌状态下全部倒入0.9％的生理盐水中，震荡使其溶解，在30℃恒温箱中静止活化30分钟，备用。3)母发酵剂的制备分别量取5株益生菌培养基各200ml于5只500ml三角瓶内，121℃灭菌20分钟冷却至30℃，按培养基体积的10％接种2.1步骤中已经活化的菌种，在30℃厌氧箱内静止培养24小时，作为母发酵剂。4)生产发酵剂的制备首先配制质量百分比浓度为10％的脱脂奶乳浊液，分装于5只500mL三角瓶内，每瓶200mL，121℃灭菌20分钟冷却至30℃，分别按2％体积比例接种母发酵剂，30℃厌氧培养36——40小时，检测5株益生菌发酵液活菌数，各发酵液活菌数≥109个/ml，视同为发酵成熟，如果活菌数＜109个/ml，继续培养，直至达到109个/ml。5)粉末冻干菌种的制备将成熟的生产发酵剂在无菌条件下导入玻璃安瓶中，液面高度低于1cm，加盖瓶塞后放入‑30℃冰柜速冻，冻结后将玻璃安瓶用托盘乘装，放入冻干机进行冷冻干燥，制备粉末冻干菌种。6)复合益生菌发酵剂冻干粉的制备按各粉末冻干菌种重量，取A菌粉末2‑3份，B菌粉末2‑4份，C菌粉末1‑2份，D菌粉末2‑3份，E菌粉末2‑3份，充分混匀后制成复合益生菌发酵剂冻干粉，用于发酵浓缩蓝莓果浆，复合益生菌发酵剂冻干粉的添加量为发酵物料固形物重量的0.025％。7)浓缩果浆的制备将100公斤蓝莓原果浆低温减压浓缩至40‑45公斤，按浓缩果浆重量的5％添加白砂糖，搅拌使其溶解，制备浓缩果浆。8)杀菌浓缩果浆通臭氧进行杀菌，当浓缩果浆中臭氧含量在0.2‑0.3mg/L时，停止臭氧通入，密闭无菌保存20分钟。9)升温将经8)步骤获得的浓缩浆料，缓慢升温至30℃。10)复合益生菌发酵按该浆料固形物重量的0.025％添加6)步骤制备的复合益生菌发酵剂冻干粉，充分搅拌混匀后，30℃静止保温发酵48小时。11)冷冻干燥将10)步骤发酵处理后的物料，放入冷冻干燥机进行冷冻干燥，获得益生菌发酵蓝莓果浆粉。