[发明专利]一种鉴别建鲤不同家系的分子标记方法有效
| 申请号： | 201110262010.9 | 申请日： | 2011-09-06 |
| 公开（公告）号： | CN102382878A | 公开（公告）日： | 2012-03-21 |
| 发明（设计）人： | 李建林;俞菊华;唐永凯;李红霞;董在杰 | 申请（专利权）人： | 中国水产科学研究院淡水渔业研究中心 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 | 代理人： | 李纪昌 |
| 地址： | 214081*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明涉及一种鉴别建鲤不同家系的分子标记方法，其特征是：选用12对特异微卫星标记引物，从不同家系的建鲤个体及其亲本采样血液或鳍条，提取基因组DNA，对所提取的基因组DNA进行PCR扩增，PCR产物进行电泳分离。将PCR的电泳检测结果进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，并构建进化树，根据个体间的遗传距离聚类结果，就能区分来自不同家系的个体。本发明能快速、有效地鉴别建鲤不同家系，为建鲤选育和繁殖配组提供帮助。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 不同 家系 分子 标记 方法 | ||
【主权项】：
一种鉴别建鲤不同家系的分子标记方法，其特征在于，采用以下提取步骤：（1）选用12对特异微卫星引物进行PCR反应，这12对特异微卫星引物名称和序列列表如下：编号 正向引物DNA序列(5'‑3') 反向引物DNA序列(5'‑3') 退火温度1 cctgacacctgccgttcttcctctgttctgcctccc60℃2caggaggacgtaagggagagggctgaggagtgatgaa60℃3 cccctctgcccaatgacacggtgagcgagaaacgaa60℃4gaaaggagttcccacaagagctgaggacctagacgt58℃5agatttcgtctaccaaggacttccacctgagacaacac54℃6tcctgcatctgagtgacagccagacattagccgggtagga59℃7gtgacgacagcgttagcattaacaagcgcaggctaatcat62℃8acacacctgcgctcactaaattgtgtttcaggctacaaaagg57℃9aaacacagccagacatgcagtgcttcaaatcaatccacaaa59℃10ctgagctgacctcgtgtctgttttctgcggaaacattgtg59℃11ctgcccaacatcaacaagtgcatgcaaactgcaaggacat59℃12tgcattattgtgtccctccacacagcatgagcagaggaag60℃（2）从待测不同家系的建鲤个体及亲本采样血液或鳍条，采用DNA提取法提取基因组DNA；（3）用步骤（2）的基因组DNA为模板，步骤（1）所选的12对微卫星引物分别进行PCR扩增；（4）对步骤（3）的PCR产物用8.0％的聚丙烯酰胺凝胶进行电泳分离，银染法染色后，拍照记录电泳结果；（5）将PCR的电泳检测结果进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，并构建进化树，根据个体间的遗传距离聚类结果，区分来自不同家系的个体。
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