[发明专利]一种铁皮石斛人工种子的制作方法

摘要

本发明公开了一种铁皮石斛人工种子的制作方法，将铁皮石斛茎在培养基上诱导并获得原球茎，然后进行原球茎的增殖培养，再转入含有0.5mg/L的ABA的MS培养液内震荡培养，每10d更换1次培养液。30d后选取原球茎作为包埋繁殖体，采用滴注法进行人工种子制作，以MS培养基、4mg/L的6-BA、0.4mg/L的NAA、2％的海藻酸钠和0.2％的多菌灵为基本人工胚乳，以海藻酸钠添加2％壳聚糖和5.0-10％纳米TiO2为人工种皮基质，并进行人工种子的萌发和储藏研究。通过本发明的制作方法既可以提高种子的萌发率，又方便储藏运输。在人工胚乳或人工种皮中添加特殊材料还可以促进其萌发或延长人工种子的储存。

主权项

一种铁皮石斛人工种子的制作方法，其特征在于：其具体步骤为：1)原球茎的诱导：选择铁皮石斛健康植株，经过切段、灭菌、清洗后，接种于预先做好的分化增殖培养基的组培瓶中，在培养基上诱导出原球茎，然后进行原球茎的增殖培养；2)人工种子的制作：将原球茎再转入含有0.5mg/L的ABA的MS培养液内，以100r/min的速度震荡培养，每10d更换1次培养液；30d后选取长×宽为0.5‑1.5mm×2.0‑3.4mm的原球茎作为包埋繁殖体，采用滴注法进行人工种子制作；以MS培养基、4mg/L的6‑BA、0.4mg/L的NAA、2％的海藻酸钠和0.2％的多菌灵为基本人工胚乳；以海藻酸钠添加2％壳聚糖和5.0‑10％纳米TiO2为人工种皮基质；将原球茎浸入人工胚乳中，使原球茎与包埋剂充分混合均匀；5‑10min后用滴管将包有原球茎的半凝胶状态海藻酸钠滴入到人工种皮基质的2％CaCl2溶液中进行固化，控制每滴包含一个原球茎，30min后用培养液漂洗15min，即得人工种子。