[发明专利]一种定量检测6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)的检测方法及试剂有效
申请号: | 201110302994.9 | 申请日: | 2011-10-09 |
公开(公告)号: | CN102507482A | 公开(公告)日: | 2012-06-20 |
发明(设计)人: | 连国军;陶国锋 | 申请(专利权)人: | 上虞市创烨生物有限公司 |
主分类号: | G01N21/33 | 分类号: | G01N21/33 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 312300 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种定量检测6-甲基-2-硫代吡啶-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷(MPT-NAG)的检测方法及试剂。本发明所述检测方法的测定原理为:测定试剂中的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶将MPT-NAG催化分解产生6-甲基-2巯基吡啶(MPT)和N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖,反应中生成的MPT在205nm、270nm、340nm处有最大吸收,通过测定37℃反应一段时间后特定波长下溶液的吸光度值,计算出样品中MPT-NAG的含量。本方法所涉及的化学品均无毒、易得,符合发展绿色检测方法的要求,检测灵敏度高,线性、精密度好,结果准确,且操作简便快速,可用于各种类型的分析仪,满足大规模测定样本的要求。 | ||
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【主权项】:
一种定量检测6‑甲基‑2‑硫代吡啶‑N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷(MPT‑NAG)的检测方法,其特征在于包括如下步骤:1)配制含有MgCl2、EDTA·2Na、N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶、聚乙二醇6000、乙二醇、蔗糖的pH4.0‑5.0柠檬酸‑柠檬酸三钠缓冲液;2)加入含MPT‑NAG的待测样品,反应一段时间,试剂中的N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖苷酶将MPT‑NAG催化分解产生6‑甲基‑2巯基吡啶(MPT)和N‑乙酰‑β‑D‑氨基葡萄糖;3)通过测定特定波长下溶液的吸光度值,计算出待测样品中MPT‑NAG的含量。
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