[发明专利]微量核酸样本的文库制备方法及其应用

摘要

本发明涉及微量核酸样本的文库制备方法及其应用，所述方法包括：用DOP(Degenerate Oligonucleotide Primed)引物对样本中的DNA进行第一次扩增，DOP引物序列具有至少5′端非简并核苷酸区和3′端简并核苷酸区；用DOP-Amp引物对第一PCR产物进行第二次扩增，获得第二PCR扩增产物；对第二PCR扩增产物进行接头连接PCR(adaptor-ligation PCR)，获得第三PCR产物，两端带有测序接头的第三PCR产物即为核酸文库。所述文库可以进行片段大小选择和高通量测序，得到样本中疾病相关的基因信息。本发明还提供一种试剂盒及其在所述微量核酸样本文库制备的用途。

主权项

一种制备核酸文库的方法，其特征在于，包括步骤：a.提供一待测样本，所述样本含有的核酸总量为2皮克～1微克；b.对待测样本进行DOP‑PCR扩增，获得第一PCR扩增产物；c.用DOP‑Amp引物对第一PCR扩增产物进行第二次PCR扩增，获得第二PCR扩增产物；d.对获得的第二PCR扩增产物进行接头连接PCR，获得第三PCR扩增产物，即为核酸文库；较佳地，所述的第三PCR扩增产物的5′端具有接头，且3′端具有接头。