[发明专利]快速检测基因组中基因拷贝数的方法无效
| 申请号： | 201110317115.X | 申请日： | 2011-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN102337340A | 公开（公告）日： | 2012-02-01 |
| 发明（设计）人： | 计皖;李健;柳金凤 | 申请（专利权）人： | 宁夏林业研究所股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N21/64 |
| 代理公司： | 宁夏专利服务中心 64100 | 代理人： | 叶学军 |
| 地址： | 750004 宁夏回族*** | 国省代码： | 宁夏;64 |
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| 摘要： | 快速检测基因组中基因拷贝数的方法，包括以下操作步骤：1）选取生物体中一个已知拷贝数的基因为内参照基因，分别设计目标基因和内参照基因的TaqManPCR引物和探针；2）用PCR反应将目标基因和内参照基因分别扩增和纯化，测试各自的重量浓度，并根据其核酸片段长短，将重量浓度换算为摩尔浓度；3）将目标基因和内参照基因按不同摩尔浓度比混合成系列标准品，用实时PCR仪分别测定目标和内参照基因标准品的阈值荧光循环数，并将系列阈值荧光循环数差值与相应摩尔浓度比的对数做成标准曲线；4)提取并纯化所测生物体DNA，用实时PCR仪分别测定目标和内参照基因的阈值荧光循环数，算出其差值，然后按照标准曲线将其换算为目标基因和内参照基因摩尔浓度比，亦即基因拷贝数比。 | ||
| 搜索关键词： | 快速 检测 基因组 基因 拷贝 方法 | ||
【主权项】：
快速检测基因组中基因拷贝数的方法，包括以下操作步骤：1）选取生物体中一个已知拷贝数的基因为内参照基因，分别设计目标基因和内参照基因的TaqMan PCR引物和探针；2）用PCR反应将目标基因和内参照基因分别扩增和纯化，测试各自的重量浓度，并根据其核酸片段长短，将重量浓度换算为摩尔浓度；3）将目标基因和内参照基因按不同摩尔浓度比混合成系列标准品，用实时PCR仪分别测定目标和内参照基因标准品的阈值荧光循环数，并将系列阈值荧光循环数差值与相应摩尔浓度比的对数做成标准曲线；4)提取并纯化所测生物体DNA，用实时PCR仪分别测定目标和内参照基因的阈值荧光循环数，算出其差值，然后按照标准曲线将其换算为目标基因和内参照基因摩尔浓度比，亦即基因拷贝数比。
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