[发明专利]基于SSR-PCR的油菜杂交种种子纯度检测方法无效
| 申请号： | 201110317531.X | 申请日： | 2011-10-18 |
| 公开（公告）号： | CN102321767A | 公开（公告）日： | 2012-01-18 |
| 发明（设计）人： | 王同华;陈卫江;李莓;曲亮;范连益;惠荣奎 | 申请（专利权）人： | 湖南省作物研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 湖南兆弘专利事务所 43008 | 代理人： | 杨斌;彭选明 |
| 地址： | 410125*** | 国省代码： | 湖南;43 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于SSR-PCR的油菜杂交种种子纯度鉴定方法，包括以下步骤：取待测油菜杂交种样品种子进行发芽培养，将培养的幼苗进行碱裂解，同时进行超声波破碎处理，加入提取缓冲液后得到基因组DNA溶液；利用SSR引物序列对基因组DNA进行PCR扩增；PCR扩增产物在琼脂糖凝胶中进行稳压电泳分离；电泳分离后的PCR扩增产物置于凝胶成像系统中成像、读带，将样品种子的谱带特征与其父母本种子进行比对，统计出样品种子中具有父本谱带特征和母本谱带特征的种子数量，再根据品种纯度公式即可得到待测油菜杂交种样品的纯度。本发明的鉴定方法具有快速简便、高通量、检测成本低、检测效率高、检测结果稳定可靠等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 ssr pcr 油菜 杂交种 种子 纯度 检测 方法 | ||
【主权项】：
一种基于SSR‑PCR的油菜杂交种种子纯度鉴定方法，包括以下步骤：(1)DNA提取：取数量为N的待测油菜杂交种样品种子进行发芽培养，将培养后的幼苗进行碱裂解，同时进行超声波破碎处理，再加入提取缓冲液，混匀后得到所述杂交种样品种子的基因组DNA溶液；(2)PCR扩增：利用SSR引物序列对步骤(1)中所述杂交种样品种子的基因组DNA进行PCR扩增；(3)电泳分离：将步骤(2)中PCR扩增产物在琼脂糖凝胶中进行稳压电泳分离；(4)显带读数：将步骤(3)中电泳分离后的凝胶置于凝胶成像系统中成像、读带，将所述杂交种样品种子的谱带特征与其父母本种子的谱带特征进行比对，统计出所述杂交种样品种子中具有父本谱带特征和母本谱带特征的种子数量n，再根据公式“品种纯度(％)＝(1‑n/N)×100％”即可得到待测油菜杂交种样品的纯度。
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