[发明专利]一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，该方法包括如下步骤：外植体的处理→愈伤组织诱导→芽分化培养→生根培养→炼苗和移栽。本发明以苦荞麦次生代谢物总黄酮含量高的叶柄为外植体可快速繁殖品种优良的苦荞麦再生植株，为苦荞麦植物优良品种的选育和快速繁殖提供一条新途径。

主权项

一种以苦荞麦叶柄为外植体的植株快速繁殖方法，其特征在于包括如下步骤：(1)外植体的处理：选取生长健康和无病虫害的苦荞叶，切去叶片部分，将叶柄用浓度为0.1％的升汞消毒2～6分钟，再用无菌水清洗3～4次；(2)愈伤组织诱导：将消毒后的叶柄外植体上的水分吸干，再切成0.7cm～1.5cm的长度，然后接入愈伤组织诱导培养基MS+6‑BA 0.1～2.0mg/L+2，4‑D 1～6mg/L+IAA 0～1mg/L中进行培养；(3)芽分化培养：选取质地较紧密、生长状况良好的愈伤组织，将其切成0.5～1.0cm2的块状后，接入芽分化培养基MS+6‑BA 1.0～4.0mg/L+NAA0.1～1mg/L+KT 0～1.5mg/L中进行培养；(4)生根培养：当不定芽长至2.0～4.0cm时，将其切下转接到生根培养基MS+IBA 0～2.0mg/L上进行生根培养；(5)炼苗和移栽：当组培苗不定根生长健壮时，打开瓶盖，先在室内炼苗2～4天，再将组培苗从培养瓶中取出，洗去不定根上的培养基，将其移栽至松软的土壤中生长；上述所有培养基的pH值为5.5～6.7、蔗糖15～50g·L‑1、琼脂6.0～7.0g·L‑1；上述光照培养条件均为每天光照8～16小时、光照强度为1500～2500lx、培养温度20～27℃。