[发明专利]一种可直接移栽的铁皮石斛育苗方法

摘要

本发明涉及一种组培方法，尤其是针对铁皮石斛的组培方法，属于生物技术领域。要解决的技术问题是提供一种组培苗可直接移栽的铁皮石斛组培方法。为解决上述问题，本发明改进了现有的培养基配方，独创了具有透光性能好，感染率低空气充足的专用组培杯，并提供清洁适宜的自然光环境，在三者的共同作用下，可以由一棵铁皮石斛的蒴果种子通过7-8个月的组织培养，培育出20万株的石斛组培苗，该组培苗无需传统的3-5个月的训化（炼苗）过程，可直接移栽到室外，移栽成活率在98%上以。

主权项

一种可直接移栽的铁皮石斛育苗方法，其特征在于该育苗方法包括下列步骤： 1）将铁皮石斛的蒴果种子经消毒后，播入专用培养基Ⅰ+专用组培杯+专用培养室里，进行萌发培养，培养温度为24‑26℃，湿度为65‑75%，光照度为1000‑2000lx，光照时间为10‑12小时/日，培养45‑60天，外植体萌芽形成绿色的原球茎；2）将原球茎转入专用培养基Ⅱ+专用组培杯+专用培养室里，进行原球茎增殖、分化培养，培养温度为22‑28℃，湿度为65‑75%，光照度为1500‑2500lx，光照时间为10‑12小时/日，培养60天，由原球茎培育成1‑2CM小苗，同时伴随着有部分新原球茎产生，再将小苗转入同样的组培杯、培养基和环境下继续培养1个月,将小苗培养成中苗，苗高为3‑4cm；3）将中苗转入专用培养基Ⅲ+专用组培杯+专用培养室里，培养温度为20‑30℃，湿度为65‑75%，光照度为2000‑4000lx，光照时间为10‑12小时/日，培养60天，由小苗培育成高为5‑9CM，茎粗为 0.4‑0.5CM的壮苗；所述专用培养基Ⅰ包括1/2MS基本培养基+芋头汁15‑25%(V/V)+琼脂4‑6g/L，PH值为5.2‑5.8；所述专用培养基Ⅱ包括MS基本培养基+ BA(6‑卞氨基腺嘌呤)0.1‑0.2mg/L+琼脂4‑6g/L+土豆汁6‑10%(V/V)+香蕉汁10‑14%(V/V)， PH值为5.4‑5.8；所述专用培养基Ⅲ包括MS基本培养基+ NAA (α‑萘乙酸)0.1‑0.2mg/L+香蕉汁8‑10%(V/V)+土豆汁5‑7%(V/V) +芋头汁8‑12%(V/V) +琼脂4‑6g/L，PH值为5.4‑5.8；所述专用组培杯为具有适度容积的透明的塑料杯体（1），所述塑料杯体（1）杯口通过透明的塑料膜（2）塑封，所述塑料膜（2）上设置滤膜（3）；所述专用培养室为灭菌培养室，所述灭菌室采用自然光照，其顶端设置采光瓦和遮阳网，内部设有温度湿度调节设备。