[发明专利]肠炎沙门氏菌的链置换恒温扩增(SDA)快速检测试剂盒及其检测方法无效
申请号: | 201110345106.1 | 申请日: | 2011-11-04 |
公开(公告)号: | CN102382884A | 公开(公告)日: | 2012-03-21 |
发明(设计)人: | 张京宣;彭青;魏晓棠;李美芹;宋涛;尼秀媚;雷质文;李伟涛;毕建秀;张健 | 申请(专利权)人: | 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 266002 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种用依赖于链置换扩增技术的肠炎沙门氏菌恒温扩增快速检测试剂盒及其检测方法。该试剂盒内有模板预处理反应液、链置换扩增反应液Ⅰ、Bst DNA Polymerase,BsoBI。检测肠炎沙门氏菌的方法包括细菌DNA的提取、模板预处理、SDA链置换恒温扩增、核酸检测。其优点是快速、特异性强、灵敏度高而且成本低。 | ||
搜索关键词: | 肠炎 沙门氏菌 置换 恒温 扩增 sda 快速 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
【主权项】:
一种肠炎沙门氏菌的恒温扩增快速检测试剂盒,其特征在于包括:(1)模板预处理反应液:1×NEB buffer 2、1.0μM上游内引物S1、1.0μM下游内引物S2、3%(V/V)二甲基亚砜、和ddH2O;所述1×NEB buffer2为:50mM NaCl、10mM Tris‑HCl、10mM MgCl2、1mM二硫苏糖醇,和ddH2O,pH 7.9;所述的引物S1和S2分别如SEQ ID NO:1和2所示;(2)链置换扩增反应液I:3%(V/V)二甲基亚砜,0.1mg/mL牛血清白蛋白,浓度分别为0.2mM dATP、dGTP和dTTP的混合液,1.0mM dCTPαS,1×NEB buffer 2,和ddH2O。(3)Bst DNA聚合酶;(4)限制性内切酶BsoBI。
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